敲低trem2通过JAK2/STAT3和NF-κB通路促进促炎性小胶质细胞并抑制胶质瘤进展

背景：在肿瘤免疫微环境（TIME）中，髓样细胞表达的触发受体2（trem2）被广泛认为是肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）上的关键分子。多项研究表明，trem2可能在多种恶性肿瘤中作为免疫检查点，介导肿瘤免疫逃逸。然而，其具体分子机制，尤其是在胶质瘤中，仍不清楚。方法：通过慢病毒转染建立稳定敲低trem2的细胞。使用Transwell系统进行胶质瘤细胞和小胶质细胞的隔离共培养。使用Western blotting、实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和免疫荧光（IF）检测靶蛋白的表达水平。通过集落形成、细胞计数试剂盒-8（CCK8）、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EdU）和transwell实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移。使用流式细胞术评估细胞的细胞周期、凋亡率和活性氧（ROS）水平。使用彗星实验和管形成实验分别检测胶质瘤细胞的DNA损伤和血管生成活性。使用Gl261细胞系和C57BL/6小鼠构建胶质瘤原位移植瘤模型。结果：Trem2在胶质瘤TAMs中高表达。在小胶质细胞中敲低trem2在体内和体外均抑制了胶质瘤细胞的生长和血管生成活性。机制上，在小胶质细胞中敲低trem2通过激活jak2/stat1和抑制NF-κB p50信号通路，促进促炎性小胶质细胞并抑制抗炎性小胶质细胞。促炎性小胶质细胞产生高浓度的一氧化氮（NO）和高水平的促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β，并进一步引起DNA损伤，促进肿瘤细胞的凋亡率。结论：我们的研究结果表明，小胶质细胞中的trem2在胶质瘤的TIME中发挥重要作用。在小胶质细胞中敲低trem2可能有助于提高抑制胶质瘤生长和延缓肿瘤进展的效率，并为胶质瘤的进一步治疗提供新思路。