LncRNA FENDRR通过m6A RNA甲基化介导DRP1 DNA甲基化调控低氧诱导的肺动脉内皮细胞焦亡

背景：焦亡是一种程序性细胞死亡形式，参与低氧性肺动脉高压（HPH）的病理生理进程。新出现的证据表明，N6-甲基腺苷（m6A）修饰的长链非编码RNA（lncRNA）转录本是参与许多疾病的重要调控因子。然而，m6A修饰的lncRNA转录本是否能调控HPH进展中的焦亡仍未被探索。方法：通过定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）和荧光原位杂交（FISH）检测低氧人肺动脉内皮细胞（HPAECs）中FENDRR的表达水平。使用Western blot、乳酸脱氢酶（LDH）释放实验、Annexin V-FITC/PI双染、Hoechst 33342/PI荧光染色和Caspase-1活性实验检测FENDRR在HPAEC焦亡中的作用。使用生物信息学分析、染色质RNA纯化（CHIRP）、电泳迁移率变动实验（EMSA）和甲基化特异性PCR（MSP）探讨FENDRR与动力相关蛋白1（DRP1）之间的关系。使用RNA免疫沉淀（RIP）和m6A斑点印迹检测FENDRR的m6A修饰水平。使用低氧诱导的肺动脉高压（PH）小鼠模型测试FENDRR的保守片段TFO2的预防效果。结果：我们发现FENDRR在低氧HPAECs的细胞核中显著下调。FENDRR过表达抑制低氧诱导的HPAEC焦亡。此外，DRP1是FENDRR的下游靶基因，FENDRR与DRP1启动子形成RNA-DNA三链体，导致DRP1启动子甲基化增加，从而降低DRP1的转录水平。值得注意的是，我们阐明了m6A阅读器YTHDC1在m6A修饰的FENDRR降解中发挥重要作用。此外，FENDRR的保守片段TFO2过表达在体内预防了HPH。结论：总之，我们的结果表明，m6A诱导的FENDRR衰变通过调节DRP1启动子甲基化促进HPAEC焦亡，从而为HPH治疗提供了一个新的潜在靶点。