急性呼吸窘迫综合征中肺泡上皮糖萼脱落加重上皮屏障破坏并扰乱上皮紧密连接

急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的主要病理生理机制涉及肺泡屏障通透性增加，这主要由上皮糖萼和紧密连接（TJ）蛋白破坏引起。本研究旨在探讨肺泡上皮糖萼对ARDS中上皮屏障，特别是紧密连接蛋白的影响。我们使用C57BL/6小鼠和人肺上皮细胞模型，通过脂多糖（LPS）诱导ARDS。通过肺组织病理学分析和肺湿/干重比评估肺泡通透性的变化。通过ELISA、免疫荧光分析和Western blotting分析评估硫酸乙酰肝素（HS）（上皮糖萼的重要组分）的降解以及上皮紧密连接蛋白（occludin、zonula occludens 1和claudin 4）水平的变化。实时定量聚合酶链反应用于检测紧密连接蛋白的mRNA。通过电子显微镜评估肺泡上皮细胞中糖萼和紧密连接超微结构的变化。在体内和体外，LPS增加肺泡通透性并导致HS降解和紧密连接损伤。LPS刺激后，肺泡上皮细胞中HS降解酶乙酰肝素酶（HPA）的表达增加。HPA抑制剂N-脱硫酸化/再N-乙酰化肝素减轻了LPS诱导的HS降解并减少了紧密连接损伤。在体外，重组HPA降低肺泡上皮细胞中紧密连接蛋白zonula occludens-1（ZO-1）的表达并抑制其mRNA表达。综上所述，我们的结果表明，肺泡上皮糖萼的脱落加重了ARDS中的上皮屏障并损害了上皮紧密连接蛋白，其潜在机制涉及HPA对ZO-1的影响。