ACT001 通过抑制胶质母细胞瘤中 STAT3 的磷酸化来降低 PD-L1 的表达

ACT001 源自一种古老的抗炎药物，临床前研究表明其可穿越血脑屏障，并在临床试验中显示出抗胶质母细胞瘤（GBM）活性。然而，其抗 GBM 免疫反应调节的药理学潜力仍不清楚。ACT001 的化学结构表明它可能与 STAT3 结合，从而调节抗肿瘤免疫反应。 方法：使用生物信息学和免疫组织化学（IHC）评估胶质瘤中 STAT3 和 PD-L1 的表达。使用蛋白质印迹、RT-PCR 和免疫荧光检测暴露于 ACT001 的胶质瘤细胞中 PD-L1 和 p-STAT3 的表达。使用染色质免疫沉淀、ACT001-生物素探针和双荧光素酶报告基因测定法检测直接调节。在 GL261 鼠胶质瘤模型中评估了 ACT001 的体内功效。使用对数秩（Mantel-Cox）检验进行生存分析。 结果：来自 4 个公共胶质瘤数据集的 1,837 个样本的生物信息学分析显示，STAT3 mRNA 表达与恶性肿瘤程度和治疗耐药性相关，并且 STAT3 mRNA 表达与免疫抑制、白细胞浸润和 PD-L1 表达相关。53 个组织样本的 IHC 染色证实，相对较高的磷酸化 STAT3 和 PD-L1 蛋白表达与相对晚期的世界卫生组织（WHO）胶质瘤分级相关。接下来，我们证实 ACT001 处理降低了 PD-L1 表达和 STAT3 磷酸化。使用 ACT001-生物素探针验证 ACT001 与 STAT3 结合。我们还证明了 STAT3 与 PD-L1 启动子结合。ACT001 对 PD-L1 表达和 STAT3 磷酸化的抑制作用可通过 STAT3 过表达来挽救。此外，ACT001 在体内抑制 GBM 生长并降低 PD-L1 表达。ACT001 在体内降低了 M2 标志物 CD206 和 CD163 的表达，同时增加了抗肿瘤免疫标志物 iNOS 和 IFNγ 的表达。 结论：我们的结果表明，STAT3 在胶质瘤的免疫抑制中起关键作用，并被 ACT001 抑制。ACT001 抑制 PD-L1 转录并调节荷瘤小鼠胶质瘤的抗肿瘤免疫反应。这些发现将有助于我们理解 ACT001 在 GBM 治疗中的机制。