白血病抑制因子通过PI3K/Akt依赖的Tbx-3激活通路调控狨猴诱导多能干细胞增殖

白血病抑制因子（LIF）是白细胞介素-6家族中多效性最强的细胞因子，广泛用于建立和维持多能干细胞，尤其是小鼠多能干细胞。然而，尚无研究完全阐明LIF在狨猴诱导多能干细胞（iPSC）培养中的应用，特别是其潜在机制。为了证明LIF应用于狨猴iPSCs的可行性，本研究在LIF存在的情况下评估了这些细胞。使用MTT法测量细胞增殖，通过流式细胞术分析异硫氰酸荧光素Annexin V染色确定细胞凋亡，并使用数字基因表达（DGE）分析差异表达基因。通过逆转录定量聚合酶链反应和western印迹分析确认了多能性相关基因表达的改变。此外，在LY294002处理后，通过MTT法测定细胞增殖，并通过western印迹确认蛋白水平。结果表明，LIF显著促进增殖细胞数量，但对凋亡无影响。使用数字基因表达分析检测狨猴iPSCs在LIF存在下的差异表达基因。结果显示，多能性相关转录因子编码基因T-box 3（Tbx-3）被LIF激活。值得注意的是，LIF增加了狨猴iPSCs中磷酸化（p-）AKT和Tbx-3的水平。此外，用LY294002（一种磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂）预处理，显著损害了LIF诱导的狨猴iPSCs中p-AKT和Tbx-3的上调，表明PI3K/Akt信号通路参与这种调控。综上所述，结果提示LIF可有效维持培养中的狨猴iPSCs，这与通过调节PI3K/Akt信号通路激活Tbx-3有关。