WTAP介导的NLRP3 mRNA N6-甲基腺苷修饰在糖尿病肾病肾损伤中的作用

背景：糖尿病肾病（DN）在糖尿病患者中常见。已发现N6-甲基腺苷（m6A）甲基化可引起核苷酸结合寡聚化结构域、富含亮氨酸重复序列和含pyrin结构域（NLRP）3的修饰，NLRP3参与细胞焦亡和炎症。WTAP是调节NLRP3 m6A的关键基因。方法：在本研究中，在高糖（HG）处理的HK-2细胞中沉默或过表达WTAP，以确定其对焦亡、NLRP3炎症小体相关蛋白和促炎细胞因子释放的影响。在存在WTAP shRNA（shWTAP）的情况下评估NLRP3表达和m6A水平。引入组蛋白乙酰转移酶p300抑制剂C646后检测HK-2细胞中WTAP的表达。结果：我们发现，在DN患者和HG处理的HK-2细胞中WTAP表达增强。敲低WTAP可减弱HG诱导的HK-2细胞和db/db小鼠的细胞焦亡及NLRP3相关的促炎细胞因子，而WTAP过表达则促进HK-2细胞中的这些细胞过程。WTAP介导了NLRP3 mRNA的m6A修饰，该mRNA被胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1稳定。组蛋白乙酰转移酶p300调节WTAP表达。WTAP mRNA水平与NLRP3炎症小体成分和促炎细胞因子呈正相关。结论：综上所述，WTAP促进NLRP3 mRNA的m6A甲基化，以上调NLRP3炎症小体活化，从而进一步诱导细胞焦亡和炎症。