癌症相关成纤维细胞通过lncRNA SNHG5介导的血管生成和血管通透性促进乳腺癌前转移微环境形成

背景：转移是乳腺癌（BC）患者死亡的主要原因。原发肿瘤在继发器官中形成前转移微环境（PMN），为随后的转移做准备。癌症相关成纤维细胞（CAFs）是肿瘤微环境中的主要基质成分，是肿瘤转移的重要促进因素。然而，在乳腺癌中，原发CAFs在继发器官前转移微环境中的功能和机制仍不清楚。方法：我们使用lncRNA微阵列分析了来自乳腺肿瘤组织的CAFs和NFs配对样本中lncRNA的表达谱。通过qRT-PCR评估lncSNHG5、ZNF281、IGF2BP2、CCL2和CCL5的表达水平；通过western blotting和/或ELISA分析原代和永生化CAFs及临床样本中相关基因（如ZNF281、IGF2BP2、CCL2和CCL5）的蛋白水平。进行了管形成和三维出芽实验以及组织荧光染色以研究血管生成。进行了体外通透性实验、跨内皮侵袭实验、体内通透性实验和组织荧光染色以检查血管通透性。通过RNA测序、荧光原位杂交、细胞分级分离实验、质谱、RNA pull-down、RNA免疫沉淀、基因特异性m6A实验、染色质免疫沉淀、双荧光素酶报告基因实验和放线菌素D处理在CAFs和NFs中研究了lncSNHG5的调控机制。结果：LncSNHG5在乳腺CAFs中高表达，并通过调控CAFs中的ZNF281，通过促进血管生成和血管渗漏在前转移微环境形成中发挥重要作用。lncSNHG5通过与m6A阅读器IGF2BP2结合增强ZNF281 mRNA的稳定性。增强的ZNF281转录调控CCL2和CCL5的表达，以激活内皮细胞中的P38 MAPK信号通路。高CCL2和CCL5表达与BC患者的肿瘤转移和不良预后相关。抑制剂RS102895、marasviroc和cenicriviroc通过阻断CCL2/CCR2和CCL5/CCR5的结合来抑制PMN中的血管生成和血管通透性。lncSNHG5-ZNF281-CCL2/CCL5信号轴在诱导前转移微环境形成以促进BC转移中发挥重要作用。结论：我们的工作表明，CAFs中的lncSNHG5及其下游信号ZNF281-CCL2/CCL5在乳腺癌前转移微环境形成中发挥关键作用，可能作为BC转移诊断和治疗的潜在靶点。