金雀异黄酮通过JNK介导的SREBP-2激活上调LDLR水平

背景：金雀异黄酮已被证实在体外和体内降低LDLR水平。它也被广泛消费，并被认为具有抗动脉粥样硬化的作用。然而，金雀异黄酮降低LDL水平的分子机制仍然未知。目的：为了了解抗动脉粥样硬化的分子作用机制，研究了金雀异黄酮对人肝癌细胞系中LDLR（LDL胆固醇的受体）表达及相关信号通路的影响。设计：使用HepG2细胞进行实验。将不同浓度的金雀异黄酮稀释在培养基中，孵育24小时或更长时间（如所示）。蛋白质水平通过蛋白质印迹法测量，mRNA表达通过RT-qPCR检测。染色质免疫沉淀（CHIP）测定用于确定蛋白质结合水平，荧光素酶测定用于测量启动子活性。结果：金雀异黄酮以时间依赖性方式增加LDLR的mRNA和蛋白质水平。金雀异黄酮增加了含有报告基因的LDLR启动子（pLDLR-luc，-805至+50）的转录活性。但甾醇调节元件缺失突变构建体未能被金雀异黄酮激活。金雀异黄酮增加了SREBP-2的核部分以及SREBP-2与LDLR启动子的DNA结合活性，如CHIP评估。金雀异黄酮磷酸化的JNK抑制剂（SP600126）消除了金雀异黄酮刺激的LDLR和核SREBP-2水平。添加高达5 μg/mL的胆固醇24小时不影响金雀异黄酮对LDLR蛋白表达的作用。即使添加40 μM的金雀异黄酮，人肝癌细胞系的胆固醇摄取也增加了10%以上。结论：我们的数据支持金雀异黄酮可能通过激活JNK信号和SREBP-2加工，随后上调LDLR，从而发挥抗动脉粥样硬化作用的观点。