穿心莲内酯通过PI3K/AKT介导的Caspase-3/GSDME失活抑制甲型流感病毒诱导的细胞焦亡

背景/目的：甲型流感病毒（IAV）感染会引发强烈的炎症反应和急性肺损伤。穿心莲内酯是穿心莲的主要活性成分，能够减轻IAV诱导的炎症，但其确切机制尚不清楚。本研究旨在明确其宿主导向的保护作用和分子机制。方法：我们使用了致死性IAV（H1N1，PR8）感染的BALB/c小鼠模型和感染的A549细胞。测量了生存率、肺部病理、细胞因子和病毒滴度。肺组织RNA测序鉴定了失调的信号通路。通过蛋白质印迹分析了PI3K/AKT和焦亡相关蛋白。通过体内AKT抑制剂和体外AKT1 siRNA对PI3K/AKT轴进行了功能验证。结果：穿心莲内酯改善了IAV感染小鼠的生存率，减轻了体重下降，并减少了肺部病理和炎症细胞因子水平，且没有直接的抗病毒活性。与体内发现一致，穿心莲内酯增强了感染细胞的活力并抑制了细胞因子分泌。RNA测序显示，治疗小鼠肺组织中PI3K/AKT信号通路显著上调，并通过PI3K和AKT磷酸化增加得到证实。此外，穿心莲内酯下调了关键焦亡执行蛋白的表达，包括cleaved caspase-3和gasdermin E（GSDME）N端片段。这些保护作用被AKT抑制剂和AKT1 siRNA显著消除。结论：这些发现揭示了一种新的宿主导向机制，穿心莲内酯通过激活PI3K/AKT通路，从而抑制caspase-3/GSDME依赖的细胞焦亡，减轻IAV诱导的免疫病理。因此，该轴代表了控制重症流感过度炎症的一个有前景的靶点。