ATN激活Hippo通路抑制去势抵抗性前列腺癌细胞体外癌症干细胞样特性和EGFR相关信号传导

背景：去势抵抗性前列腺癌（CRPC）是前列腺癌的致死阶段，有效治疗选择仍然有限。Hippo通路效应因子Yes相关蛋白（YAP）的异常激活及其与表皮生长因子受体（EGFR）信号传导的串扰已被牵涉于肿瘤进展、癌症干性和转移。本研究旨在探讨ATN（一种基于1,2,4-恶二唑的YAP抑制剂）在CRPC细胞中的治疗潜力和潜在机制。方法：使用细胞活力、集落形成、凋亡、肿瘤球和Transwell迁移实验评估ATN在CRPC细胞系PC3和DU145中的抗癌活性。使用Western blotting和免疫荧光分析评估Hippo-YAP和EGFR信号通路。使用YAP过表达和组成型活性Akt（CA-Akt）进行功能拯救实验。结果：ATN以浓度依赖性方式显著抑制CRPC细胞活力，PC3细胞的IC₅₀值为1.13 μM，DU145细胞为0.43 μM，同时对非致瘤性成纤维细胞显示出较低的细胞毒性（IC₅₀ = 1.72 μM）。机制上，ATN增加YAP在Ser397位点的磷酸化，促进其降解，并减少核YAP定位。这伴随着YAP靶蛋白（包括c-Myc和NFκB）的下调。功能上，ATN显著抑制增殖，诱导凋亡，并抑制CRPC细胞中肿瘤球形成和CD44+/CD24-癌症干细胞（CSC）群体。此外，ATN抑制细胞迁移并减少EMT相关蛋白，包括N-钙粘蛋白、Twist、YB-1和Snail。ATN还降低双调蛋白（AREG）表达，导致EGFR激活及下游MEK/ERK和Akt/mTOR信号通路被抑制。重要的是，Akt的组成型激活部分拯救了ATN诱导的细胞毒性（约78%恢复），证实了YAP相关EGFR/Akt信号的参与。结论：ATN通过激活Hippo通路、促进YAP降解和破坏YAP相关EGFR信号网络，对CRPC细胞发挥强效抗肿瘤作用。这些发现凸显了ATN作为靶向YAP驱动的致癌信号在CRPC中治疗的有前景的候选药物。