靶向肝细胞癌中ANXA2-CD63-外泌体PD-L1轴：一种新的免疫逃逸机制及其对精准免疫治疗的启示

背景与目的：肝细胞癌（HCC）由于诊断延迟和对治疗（包括免疫检查点阻断（ICB））的耐药，仍然是全球癌症相关死亡的主要原因之一。携带程序性死亡配体1（PD-L1）的肿瘤来源外泌体通过与T细胞上的PD-1结合，诱导T细胞耗竭和全身免疫抑制，已成为免疫逃逸的关键介质。本研究探讨了Annexin A2（ANXA2）是否通过调节HCC细胞中外泌体PD-L1的表达来抑制T细胞功能并促进免疫逃逸。结果：生物信息学分析（TIMER2.0，TCGA）显示ANXA2在HCC中上调，与CD8+ T细胞减少和不良生存相关。在Hepa1-6细胞中敲除ANXA2（KO）可减少外泌体分泌和外泌体PD-L1，并通过电镜、纳米颗粒追踪和WB证实。来自对照的外泌体抑制CD8+ T细胞活化（降低CD69、IL-2、IFN-γ、TNF-α），而KO外泌体则无此作用。ANXA2 KO肿瘤在免疫活性C57BL/6J小鼠中生长较慢，但在免疫缺陷BALB/c裸鼠中则不然，突出了免疫依赖性。ANXA2缺失降低CD63蛋白稳定性而不影响mRNA。在KO细胞中重新表达CD63可恢复外泌体PD-L1，表明ANXA2通过维持CD63稳定性来促进PD-L1的外泌体整合。转录组学和药理学证据进一步支持溶酶体相关周转在ANXA2缺失后CD63丢失中的作用。结论：ANXA2通过稳定CD63上调外泌体PD-L1，驱动HCC免疫逃逸，为增强ICB疗效提供了一个新靶点。这项工作突出了肿瘤特异性的外泌体调控机制，对依赖外泌体的癌症的免疫治疗具有潜在意义。