SARS-CoV-2 Nsp14结合Tollip并激活促炎通路，同时下调干扰素-α和干扰素-γ受体

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型（SARS-CoV-2）的非结构蛋白14（Nsp14）具有N端核酸外切酶（ExoN）结构域，为病毒RNA依赖性RNA聚合酶提供校对功能，以及C端N7-甲基转移酶（N7-MTase）结构域，负责病毒mRNA帽的甲基化。Nsp14还调节宿主功能，包括激活NF-κB和下调干扰素α/β受体1（IFNAR1）。在这里，我们证明Nsp14发挥更广泛的作用，不仅激活NF-κB反应，还激活细胞外信号调节激酶（ERK）、p38和Jun氨基末端激酶（JNK）丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号，促进细胞因子产生。此外，Nsp14不仅下调IFNAR1，还下调IFN-γ受体1（IFNGR1），损害细胞对IFNα和IFNγ的反应。IFNAR1和IFNGR1的下调通过溶酶体途径发生，并在SARS-CoV-2感染的细胞中观察到。对一组Nsp14突变体的分析揭示了一致的模式。使ExoN功能失活的突变体大部分保持活性，而N7-MTase突变损害了促炎通路激活和IFN受体下调。先天免疫调节功能还需要ExoN和N7-MTase结构域同时存在，这可能反映了ExoN结构域必须存在才能实现N7-MTase活性。我们进一步确定多功能宿主蛋白Tollip为Nsp14的相互作用伙伴。相互作用需要Tollip的磷酸肌醇结合C2结构域以及C2结构域C端的序列。全长Tollip或包含Nsp14相互作用区域的片段足以抵消Nsp14介导的和非Nsp14依赖的NF-κB激活。敲低Tollip部分逆转了SARS-CoV-2感染细胞中IFNAR1和IFNGR1的下调，表明Nsp14-Tollip相互作用对Nsp14先天免疫逃逸功能具有相关性。