一种HiBiT标记的假病毒样颗粒平台，用于安全、快速定量病毒中和和抗体依赖性增强

准确量化病毒中和对于评估疫苗和抗体疗法的效力至关重要。然而，传统的中和试验需要严格的生物防护措施，或使用提高生物安全性但降低生物学相关性的感染替代物。这些限制为抗病毒免疫疗法的及时开发造成了关键瓶颈。在此，我们描述了一种使用非复制型、HiBiT标记的假病毒样颗粒（HiBiT-PsVLPs）进行安全且生物学相关的中和评估平台。这些HiBiT-PsVLPs内部包装HiBiT蛋白标签，并掺入病原病毒的糖蛋白，以在降低的生物安全水平下重现病毒进入过程。与传统假病毒不同，HiBiT-PsVLPs缺乏报告基因，并利用NanoBiT分裂荧光素酶系统，通过互补作用快速读取进入和中和的发光信号。以SARS-CoV-2刺突蛋白为概念验证，我们证明了HiBiT-PsVLPs的高效假型化、进入和中和。HiBiT-PsVLP中和具有特异性、可重复性，并能反映抗体的效力和稳定性。测定结果与已建立的替代病毒中和试验（sVNT）高度一致，且HiBiT-PsVLPs能捕获更多样化的作用机制（MoAs）。超越SARS-CoV-2，我们将HiBiT-PsVLP平台应用于其他临床相关病毒，包括HIV-1以及新兴病原体，如埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒和尼帕病毒。通过将HiBiT-PsVLPs与表达Fcγ受体（FcγR）的细胞配对，我们还证明了该系统能够检测抗体依赖性增强（ADE）的病毒进入，这是免疫疗法的一个重要安全考虑因素。综上所述，这些数据确立了HiBiT-PsVLP平台在安全和快速测量不同病毒及药物开发阶段的关键抗体活性方面的实用性。