双功能趋化因子-纳米抗体融合蛋白增强中性粒细胞募集以阻碍棘阿米巴免疫逃逸

背景：棘阿米巴角膜炎（AK）是一种严重的感染性疾病，导致严重的视力损害和低生活质量。本研究旨在探讨AK中的免疫景观，以期通过免疫治疗改善治疗结果。方法：我们对来自9名患者（3名AK患者、3名真菌性角膜炎患者和3名细菌性角膜炎患者）的角膜组织进行了单细胞转录组测序。生物信息学分析计算了不同感染性角膜炎中的细胞亚群及其比例。CellChat分析阐明了角膜炎中趋化因子的差异表达。之后，筛选阿米巴纳米抗体，合成抗体-趋化因子融合蛋白，并在体外和体内验证了它们的亲和力和趋化能力。并评估了抗体-趋化因子融合蛋白的治疗效果。结果：UMAP图显示了感染性角膜炎中的13个主要细胞簇。与非AK组相比，AK组的中性粒细胞比例显著降低。细胞通讯显示AK中CXCL通路减弱。通过筛选源自羊驼的天然抗体库获得了棘阿米巴特异性抗体。将阿米巴特异性抗体与CXCL1趋化因子偶联，该融合蛋白在体外和体内均表现出对棘阿米巴的强结合亲和力和趋化能力。此外，体内动物研究表明，该融合蛋白表现出优异的治疗效果，并能有效消除棘阿米巴负荷。解释：本研究揭示了棘阿米巴采用的免疫逃逸机制，并提供了一种治疗方法。它为通过靶向和克服免疫逃逸带来的挑战来增强感染性疾病的治疗提供了有希望的潜力。资助：本工作由国家自然科学基金（资助号82171017和82471041）和北京市医学研究所公益发展与改革试点项目（PWD&RPP-MRI，JYY2023-6）资助。