核角蛋白6A通过与TEAD1相互作用上调人乳头瘤病毒癌基因表达

背景：人乳头瘤病毒（HPV）癌基因E6和E7在宫颈癌发生中起关键作用，其表达受HPV基因组长控制区（LCR）结合的细胞转录因子调控。为阐明HPV诱导癌变的机制，鉴定宫颈癌细胞中控制LCR的宿主因子非常重要。我们先前报道LCR结合转录因子TEAD1对HPV癌基因表达至关重要。本研究旨在阐明应激反应性角蛋白6A（K6A）作为TEAD1潜在辅因子在HPV癌基因表达中的作用。方法：用针对K6A的小干扰RNA（siRNA）转染HPV16阳性宫颈癌细胞，或用表达短发夹RNA（shRNA）的慢病毒感染细胞以下调K6A表达。通过逆转录定量聚合酶链反应或Western blot检测HPV16癌基因表达。使用逆转录病毒转导在K6A缺失细胞中恢复K6A表达。通过细胞分级分离后进行Western blot分析K6A的亚细胞定位。使用染色质免疫沉淀（ChIP）评估K6A与LCR的体内结合。通过免疫共沉淀和基于荧光的体内相互作用实验评估K6A与TEAD1的物理相互作用。结果：针对K6A的siRNA转染降低了宫颈癌细胞中HPV16 E6*I mRNA和E7蛋白水平。慢病毒递送靶向K6A的shRNA也降低了E7蛋白水平并抑制细胞生长。相反，在K6A缺失细胞中异位表达shRNA抗性K6A恢复了E7表达，并且在K6A恢复细胞中进一步siRNA敲低TEAD1减弱了E7表达。K6A在宫颈癌细胞核组分中检测到，其N端具有功能性双分核定位信号。ChIP显示核K6A在体内与HPV16 LCR结合，部分依赖于TEAD转录因子的存在。最后，蛋白质-蛋白质相互作用实验证实了K6A与TEAD1在核内的结合。结论：核K6A通过TEAD1与LCR结合并上调HPV16癌基因表达，从而促进宫颈癌发展。补充信息：在线版本包含补充材料，可在10.1186/s12985-025-02832-5获取。