利用共有毒素作为抗原发现针对褐隐蛛和Gadim蝎鞘磷脂酶的广谱中和抗体

广谱中和单克隆抗体正成为治疗传染病和动物咬伤中毒的重要工具。然而，使用传统的低通量迭代蛋白质工程方法设计和开发广谱中和抗体可能很繁琐。在这里，我们提出了一种新的高通量方法，用于标准化发现广谱中和单克隆抗体，该方法依赖于噬菌体展示技术和代表相关蛋白质平均序列的共有抗原。我们通过将该方法应用于来自动物界非常遥远目的有毒鞘磷脂酶——褐隐蛛和Gadim蝎的毒液，展示了该方法的实用性。首先，我们设计了一种共有鞘磷脂酶，进行了三轮噬菌体展示选择，然后进行了基于DELFIA的筛选和排序，并将其与涉及针对天然毒素重组版本进行交叉淘选的类似实验进行了比较。其次，我们鉴定了两个scFv，它们不仅能结合共有毒素，还能在体外中和天然全毒液的鞘磷脂酶活性。最后，我们得出结论，使用共有毒素的噬菌体展示实验比涉及交叉淘选的噬菌体展示实验在产生交叉中和scFv方面更成功。