模板辅助序列敲入挽救Duchenne肌营养不良症缺失模型中的骨骼肌和心肌功能

Duchenne肌营养不良症（DMD）因其抗肌萎缩蛋白在维持肌肉功能中的复杂作用，给治疗设计带来挑战，因为截短蛋白产物的恢复在临床试验中未能完全解决疾病的病理生理学。由于约70%的患者存在缺失，能够实现靶向DNA插入以恢复全长抗肌萎缩蛋白的策略至关重要。在此，我们提出了模板辅助序列敲入（TASK），这是一种我们用于特异性纠正小鼠模型中Dmd Δ52-54突变的策略。通过使用AAV9共递送修复模板和Cas9核酸酶，将Dmd外显子52-54的剪接能力序列整合到残留的54号内含子位点，导致全长抗肌萎缩蛋白在心脏和所有骨骼肌中达到治疗相关水平的系统性恢复，从而带来显著的功能改善。TASK展示了迄今为止报道的最高效的外源DNA敲入效率，在DMD的缺失模型中实现了关键营养不良特征的挽救。