用于快速抗病毒抗体开发的RNA-to-RNA流程

抗体疗法的快速开发通常受限于对抗原生成和抗体生产所需重组蛋白的依赖。为了克服这些瓶颈，我们建立了一个自扩增复制子RNA（repRNA）免疫和治疗递送平台，该平台实现了从RNA到抗体再到RNA的端到端工作流程。在此方法中，用编码病毒样颗粒的repRNA免疫羊驼以引发抗体反应，收集外周血单个核细胞构建噬菌体展示文库，并通过高通量筛选鉴定出广泛中和的单域重链抗体（VHHs）。然后将先导VHHs重新编码为repRNA，作为治疗性构建体进行体内递送，并可针对效价、效力和血清半衰期进行工程化改造。作为概念验证，我们将此平台应用于肠道病毒D68（EV-D68），这是一种与儿童严重呼吸道疾病和急性弛缓性脊髓炎相关的新兴病原体，目前尚无疫苗或治疗方法。repRNA编码的VHHs保护小鼠免受EV-D68在肺部和鼻腔的攻击，冷冻电镜揭示了其与病毒衣壳的结合位点和中和机制。总之，这些发现展示了一个用于快速发现和递送抗病毒生物制剂的模块化平台，EV-D68则作为其原型应用。