突变扫描揭示WNT破坏复合体的底物辅助自调节机制

β-catenin破坏复合体（BDC）调控WNT-β-catenin信号通路，是结直肠癌的重要治疗靶点，但其生化复杂性阻碍了对其机制的理解。我们使用针对其组分CTNNB1、AXIN1、APC和GSK3B的平铺碱基编辑器筛选，绘制了BDC的序列-功能图谱。在约150个先前未报道的、影响WNT信号传导的突变中，我们发现了功能获得性和功能分离性等位基因，揭示了复合体组装的机制，包括一个调控TCF/LEF转录因子结合的β-catenin区域。关键的是，我们发现在APC突变癌症中存在的致癌性BDC中，AXIN1-β-catenin界面控制着信号通量。在表达截短APC的细胞中，β-catenin自身可作为支架组装BDC，建立了一种底物辅助的自调节机制。这种结构代表了一个尚未被利用的治疗弱点：加强AXIN1-β-catenin相互作用可恢复破坏复合体功能并抑制结直肠癌细胞的生长。我们的突变资源为理解WNT通路的机制和靶向治疗提供了基础。