晚期染色质体组分TSSK2参与小鼠延伸期精子细胞的翻译调控

The late chromatoid body component TSSK2 is involved in translational regulation in elongating spermatids in mice

作者信息Mari S Lehti, Lin Ma, Salli Kärnä, Samuli Laasanen, Ammar Ahmedani, Opeyemi Olotu, Matthieu Bourgery, Panyi Tran, Anu Sironen, Noora Kotaja
PMID41042594
发布时间2025-10-15
DOI10.1530/REP-25-0297

摘要

摘要:精子发生最终以剧烈的形态学转变为标志,包括染色质的紧密压缩和核重塑,这很大程度上抑制了转录。由于转录沉默,形态转变所需的精子特异性蛋白的产生,依赖于对早期细胞类型中转录的mRNA进行主动储存和翻译调控。生殖系特异性核糖核蛋白颗粒,即染色质体,在早期单倍体细胞(圆形精子细胞)中积累RNA并在RNA调控中发挥作用。在晚期单倍体细胞(延伸期精子细胞)中,CB转变为所谓的晚期-CB,其在RNA调控中的功能仍不清楚。本研究通过鉴定与已知晚期-CB标记物——睾丸特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2相互作用的蛋白质和RNA,来表征晚期-CB的功能。我们发现TSSK2和晚期-CB与翻译起始因子和核糖体蛋白相关。此外,我们揭示了TSSK2与一组特定mRNA的关联,这些mRNA在延伸期精子细胞的多聚核糖体组分中富集,支持了晚期-CB在时间调控翻译中的作用。这些结果首次将晚期-CB的功能与精子发生后期的RNA调控联系起来,为精子发生和雄性生育力所需的RNA调控过程提供了重要的新信息。

实验方法

产品清单

名称品牌货号
切片机----
SuperFrost载玻片----
3i CSU-W1 转盘共聚焦系统Intelligent Imaging Innovations--
Photometric Prime BSI sCMOS相机PhotometricPrime BSI sCMOS
63×/1.4 油浸 蔡司 Plan-Apochromat物镜Zeiss63×/1.4 Oil Plan-Apochromat
平底96孔板----
载玻片----
Dounce匀浆器----
磁性Protein G DynabeadsThermo Fisher Scientific10003D
4–20% Mini-PROTEAN TGX预制胶Bio-Rad4561093
Trans-Blot Turbo转印套装Bio-Rad1704156
Trans-Blot Turbo转印系统Bio-Rad--
Sapphire生物分子成像仪Azure Biosystems--
纳流高效液相色谱系统Thermo Fisher ScientificEasy-nLC1200
Q Exactive HF质谱仪Thermo Fisher Scientific--
液相色谱-质谱联用系统----
捕集柱----
15 cm C18柱Dr Maisch HPLC GmbHReproSil-Pur 5 μm 200 Å C18-AQ
TissueLyser LT组织研磨仪Qiagen--
5 mm不锈钢研磨珠Qiagen69990
SW 32.1 Ti转子Beckman Coulter369651
17 mL 开顶薄壁Ultra-Clear管Beckman CoulterC14297
NanoDrop ND-1000分光光度计Thermo ScientificND-1000
100 μm细胞过滤器----
Bioruptor UCD-200超声破碎仪Diagenode--
JEM-1400 Plus透射电子显微镜--JEM-1400 Plus
OSIS Quemesa 11 mPix底部安装数码相机OSISQuemesa 11 mPix
Bioanalyzer RNA 6000 Pico分析试剂盒Agilent--
2100 Bioanalyzer仪器Agilent2100
Illumina NovaSeq 6000测序平台IlluminaNovaSeq 6000
共聚焦荧光显微镜3iMarianas CSU-W1 spinning disk