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Foxp3+ CD4 T细胞表达的可溶型和膜型CD137共同抑制自身免疫性糖尿病
Both soluble and cell surface CD137 expressed by Foxp3+ CD4 T cells restrain autoimmune diabetes
摘要
CD137在Foxp3+调节性CD4 T细胞（Tregs）的一个亚群中表达，但其免疫调节功能尚未完全阐明。由于可变剪接移除了跨膜结构域编码外显子，CD137以膜型和可溶型两种形式存在。我们利用NOD小鼠1型糖尿病（T1D）模型研究了CD137在Foxp3+ Tregs中的功能。Foxp3+ Tregs特异性敲除CD137减少了循环中的可溶性CD137，并加速了T1D的发展，其驱动因素是胰岛中效应T细胞的克隆扩增和分化增强。Foxp3+ Tregs中CD137的缺失降低了它们在胰岛中的频率，并损害了它们向抑制性表型的分化。在缺乏膜型CD137的Foxp3+ Tregs中恢复可溶性CD137，降低了胰岛T细胞的活化并减轻了T1D的加速发展，且未改变抑制性Foxp3+ Tregs的积累。我们的结果表明，Foxp3+ Tregs表达的可溶型和膜型CD137对于免疫调节都至关重要，它们独立地抑制T1D的发展。
实验方法
产品清单
| 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|
| 尿糖试纸条 | Diastix; Bayer | -- |
| 10%缓冲福尔马林 | -- | -- |
| 醛品红染料 | -- | -- |
| H&E复染剂 | -- | -- |
| PathScan Enabler IV | Meyer Instruments | -- |
| ImageJ软件 | US National Institutes of Health | -- |
| Fc阻断剂 | BD Biosciences | -- |
| Zombie NIR染料 | BioLegend | -- |
| Foxp3染色缓冲液 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| LSRFortessa ×20流式细胞仪 | BD Biosciences | -- |
| Cytek Aurora | Cytek | -- |
| Hank's平衡盐溶液 | -- | -- |
| 胶原酶P溶液 | Roche Diagnostics | -- |
| 脱氧核糖核酸酶 | Sigma-Aldrich | -- |
| 胎牛血清 | -- | -- |
| RPMI 1640培养基 | -- | -- |
| 解剖显微镜 | -- | -- |
| 无酶细胞解离缓冲液 | Life Technologies | -- |
| 全T细胞分离试剂盒II | Miltenyi Biotec | -- |
| BD FACSAria II细胞分选仪 | BD Biosciences | -- |
| RPMI 1640培养基 | Gibco | -- |
| HyClone胎牛血清 | Cytiva | -- |
| 青霉素-链霉素 | Invitrogen | -- |
| β-巯基乙醇 | -- | -- |
| MEM非必需氨基酸 | Gibco | -- |
| GlutaMAX | Gibco | -- |
| 重组小鼠IL-2 | R&D Systems | -- |
| 加湿培养箱 | -- | -- |
| 小鼠4-1BB/TNFRSF9 DuoSet ELISA试剂盒 | R&D Systems | -- |
| 羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯 | eBioscience | -- |
| 抗CD3e微珠 | Miltenyi Biotec | -- |
| Fc阻断剂 | BioXCell | -- |
| 标签寡核苷酸偶联抗体 | BioLegend TotalSeq-C | -- |
| 30微米滤器 | -- | -- |
| FACSAria III | BD Biosciences | -- |
| Chromium Next GEM单细胞5'试剂盒版本2 | 10X Genomics | -- |
| KAPA文库定量试剂盒 | Roche | -- |
| Illumina NovaSeq 6000 S2试剂盒 | Illumina | 100 cycles |
| NovaSeq测序系统 | Illumina | -- |
| Chromium单细胞V(D)J富集试剂盒 | 10X Genomics | -- |
| Chromium单细胞3'版本2试剂盒 | 10X Genomics | -- |
| KAPA文库定量试剂盒 | Roche | -- |
| Illumina NextSeq测序仪 | Illumina | -- |
| NextSeq 500/550高输出试剂盒版本2 | Illumina | 150 cycles |