鸟苷酸结合蛋白5介导的细胞自主免疫抑制牙髓炎中的炎症：一项体外研究

目的：鸟苷酸结合蛋白5（GBP5）是一种干扰素（IFN）诱导的GTP酶，在针对微生物感染的细胞自主免疫中发挥关键作用。本研究探讨了GBP5在牙髓炎发病中的免疫调节作用。方法：利用基因集富集分析（GSEA）评估IFN-γ信号通路，并基于与牙髓炎相关的基因表达综合（GEO）数据集，筛选正常与发炎牙髓组织中GBP mRNA的差异表达。实验均使用正常牙髓组织和发炎牙髓组织。通过qRT-PCR检测IFNs和GBPs的表达。通过免疫印迹和双重免疫荧光检测牙髓组织中GBP5的细胞定位。在功能研究中，使用IFN-γ预处理或慢病毒载体递送的shRNA分别过表达或敲低人牙髓干细胞（HDPSCs）中的内源性GBP5表达。随后，使用LPS刺激（过表达或敲低GBP5的）HDPSCs以建立体外炎症模型。使用qRT-PCR和ELISA检测促炎细胞因子（IL-6、IL-8和IL-1β）和环氧合酶2（COX2）的表达。每个实验均设有三次生物学重复和三次技术重复。统计分析采用Student's t检验和单因素方差分析，p值<0.05被认为具有统计学意义。结果：基于GEO数据集的GSEA分析显示，人牙髓炎组中IFN-γ信号通路显著激活。在评估的人GBPs中，GBP5在发炎牙髓组织中选择性上调，且主要表达于牙髓细胞。体外实验表明，IFN-γ可强烈诱导HDPSCs中GBP5的表达。敲低HDPSCs中的GBP5表达，在有或无IFN-γ预处理的情况下，均显著增强了LPS诱导的炎症介质（IL-6、IL-8、IL-1β和COX2）的上调。结论：我们的研究结果表明，GBP5参与了牙髓炎的发病过程。GBP5参与牙髓炎似乎协调炎症细胞因子的调节。敲低GBP5有助于加剧LPS介导的炎症反应。