人参浆果汁调节急性溃疡小鼠模型的炎症,主要生物活性物质为人参皂苷 Rb3、Rc、Rd 和 Re

Ginseng Berry Juice (GBJ) Regulates the Inflammation in Acute Ulcerative Mouse Models and the Major Bioactive Substances Are Ginsenosides Rb3, Rc, Rd, and Re

作者信息Soon-Young Lee, Seung-Yub Song, Sung-Ho Lee, Gye-Yeop Kim, Jin-Woo Park, Chun-Sik Bae, Dae-Hun Park, Seung-Sik Cho
PMID38613064
期刊Nutrients
发布时间2024-04-01
DOI10.3390/nu16071031

实验完整度

包含HPLC成分分析、HCl/乙醇诱导的急性胃炎小鼠模型、宏观与组织学评估、免疫荧光与免疫组化机制验证等多个独立证据层级。

主要模型

ICR小鼠HCl/乙醇诱导急性胃炎模型 HPLC分析体系

重点核对

GBJ给药剂量:50、250、500 mg/kg,口服 CB给药剂量:500 mg/kg,口服 HCl/乙醇诱导条件:150 mM HCl 和60%乙醇,500 μL,1小时 动物分组:每组6只雄性7周龄ICR小鼠 检测终点:胃损伤面积、组织病理评分、TNF-α、IL-6、IL-13、IL-10、NF-κB、COX-2、PGE2表达

摘要

人参果因其含有大量皂苷如人参皂苷而具有多种生物学效应。本研究证实人参浆果汁对急性炎症有效。人参浆果汁用于活性成分分析、抗氧化功效和体内炎症研究。采用高效液相色谱法分析人参皂苷。在HCl/乙醇诱导的急性胃损伤模型中,使用显微、免疫荧光和免疫组化技术分析胃损伤抑制及机制研究。在HCl/乙醇诱导的急性胃炎小鼠模型中,人参浆果汁(250 mg/kg)显示出与卷心菜水提物(CB, 500 mg/kg, 口服)相似的胃损伤抑制作用。GBJ剂量依赖性地调节促炎细胞因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-13(IL-13)。GBJ抑制核因子κB(NF-κB)的活化,并抑制环氧合酶-2(COX-2)和前列腺素2(PGE2)的表达。GBJ的抗炎作用归因于具有抗炎作用的人参皂苷。作为急性胃炎的有效食物来源,其生产力分析表明GBJ优于CB。此外,作为抑制急性溃疡症状的功能性食品,认为如果GBJ以果汁形式生产而非通过各种提取方法,则胃保护产品的功效会更高。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
人参浆果汁(GBJ)是否对急性溃疡性胃炎具有保护作用,其活性成分和机制是什么?
核心机制
GBJ通过抑制NF-κB从细胞质向细胞核的易位,进而抑制COX-2和PGE2的表达,并调节促炎和抗炎细胞因子的表达,从而减轻急性炎症。
主要证据
在HCl/乙醇诱导的小鼠急性胃炎模型中,GBJ剂量依赖性地减少胃损伤面积和组织病理评分,抑制TNF-α、IL-6、IL-13表达,增加IL-10表达,并抑制NF-κB、COX-2和PGE2。
研究意义
GBJ可作为一种功能性食品,用于抑制急性溃疡症状,并且其果汁形式比提取物形式更具生产优势。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

GBJ中生物标志物的定性与定量

确定GBJ中的主要活性成分及其含量

采用HPLC分析GBJ中人参皂苷Rb3、Rc、Rd、Re及酚酸类成分,并建立标准曲线进行定量。

2

急性胃炎模型建立与药物处理

建立HCl/乙醇诱导的急性胃炎模型,并评估GBJ和CB的保护作用

雄性ICR小鼠随机分为对照组、模型组、CB阳性对照组和GBJ不同剂量组,口服给药1小时后,除对照组外均灌胃HCl/乙醇混合液诱导胃损伤。

3

胃损伤宏观与组织病理学评估

评估GBJ对胃损伤的宏观和微观保护效果

处死小鼠后取胃,拍照测量损伤面积,计算抑制率;胃组织固定、包埋、切片、H&E染色,进行组织病理评分。

4

炎症因子与信号通路检测

检测GBJ对炎症因子和NF-κB/COX-2/PGE2通路的影响

通过免疫荧光和免疫组化检测TNF-α、IL-6、IL-13、IL-10、NF-κB、COX-2和PGE2的表达。

5

数据分析

比较各组差异并评估统计学意义

数据以均值±标准差表示,采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验,p<0.05为显著差异。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
Waters Alliance 2695高效液相色谱系统Waters Co.--
Agilent Zorbax extended C18色谱柱Agilent Tech--
ZoletinVirbac--
Axioscope A1显微镜Carl Zeiss AG--
Alexa Fluor 488偶联二抗InvitrogenA3273
DAPIThermoFisher Scientific62249
K1-Fluo共聚焦显微镜Nanoscope System--
链霉亲和素过氧化物酶Vector Laboratories--
TNF-α抗体MY BioSourceMBS175453
IL-6抗体Santa Cruzsc-7920
IL-13抗体Santa Cruzsc-1776
IL-10抗体Santa Cruzsc-73309
NF-κB抗体Invitrogen51-0500
COX-2抗体Abcamab15191
PGE2抗体Biossbs-2639R

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
GBJ制备
GBJ原料来自4年生人参浆果,去籽后榨汁、冻干,得率59%。
阅读提示:参见Materials and Methods, Section 2.1
HPLC分析
色谱条件:流动相梯度、流速、柱温、检测波长等。
阅读提示:参见Materials and Methods, Section 2.2, Table 1
急性胃炎模型
动物品系、性别、周龄、体重、分组、给药剂量、给药体积、诱导剂组成、诱导时间。
阅读提示:参见Materials and Methods, Section 2.3
组织学评估
固定、脱水、包埋、切片、染色步骤及评分标准。
阅读提示:参见Materials and Methods, Section 2.4
免疫组织化学/免疫荧光
抗原修复条件、封闭、一抗、二抗、检测试剂及成像系统。
阅读提示:参见Materials and Methods, Section 2.5