Neddylation介导的hnRNPA2B1降解通过调控miR-93-5p/VEGFA加重糖尿病视网膜病变中视网膜内皮细胞功能障碍

目的：视网膜内皮细胞（RECs）是糖尿病诱导的微血管并发症的关键靶点。HnRNPA2B1抑制糖尿病视网膜病变（DR）中的病理性新生血管形成。尽管hnRNPA2B1抑制病理性新生血管形成，但其在高血糖诱导的REC功能障碍中的作用仍不清楚。方法：使用定量实时PCR（qRT-PCR）、蛋白质印迹、RNA免疫沉淀、免疫荧光染色和功能分析（伤口愈合、Transwell侵袭和管形成）分析高糖（HG）条件下的原代小鼠视网膜血管内皮细胞（mRVECs）和链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠。使用免疫共沉淀和药理学抑制剂验证蛋白质相互作用和降解途径。使用苏木精-伊红染色、光学相干断层扫描血管造影、伊文思蓝渗漏和胰蛋白酶消化评估视网膜形态和血管完整性。结果：HG诱导的neddylation介导hnRNPA2B1降解，加重REC功能障碍。机制上，hnRNPA2B1通过招募微处理器复合物中的DGCR8促进miR-93-5p成熟，从而通过直接靶向其3‘-非翻译区抑制VEGFA表达。将AAV2-hnRNPA2B1或miR-93-5p玻璃体腔递送至糖尿病小鼠中部分恢复视网膜hnRNPA2B1/miR-93-5p水平，减少VEGFA过表达，并改善微血管损伤的视网膜组织学标志物。结论：HG诱导的与neddylation通路相关的效应导致hnRNPA2B1降解，加重REC功能障碍。HnRNPA2B1作为RNA结合蛋白，通过招募微处理器复合物中的DGCR8促进miR-93-5p成熟。靶向hnRNPA2B1或miR-93-5p可能代表一种在糖尿病中维持视网膜血管稳态的潜在治疗策略，有待功能验证。