血栓反应蛋白-1激活淋巴内皮细胞中的CD47抑制淋巴管生成并促进动脉粥样硬化

背景：TSP1（血栓反应蛋白-1）——一种众所周知的血管生成抑制剂——通过与其细胞表面受体CD36和CD47相互作用介导不同效应。然而，TSP1在调节淋巴管生成中的作用尚不清楚。我们之前的研究提示细胞特异性CD47阻断在限制动脉粥样硬化中的重要性。此外，我们的实验揭示CD47是淋巴内皮细胞（LEC）中TSP1的主要受体。由于淋巴管与动脉粥样硬化功能相关，我们旨在研究LEC TSP1-CD47信号传导抑制对淋巴管生成和动脉粥样硬化的影响。方法：利用小鼠动脉粥样硬化及非动脉粥样硬化动脉，通过Western blotting和免疫染色检测TSP1表达。使用LEC特异性敲除小鼠确定LEC Cd47在淋巴管生成和动脉粥样硬化中的体内作用。采用各种体外细胞实验、体内Matrigel栓植入、分子生物学技术和免疫组织学方法评估潜在信号机制。结果：与对照非动脉粥样硬化组织相比，小鼠动脉粥样硬化主动脉组织中观察到TSP1表达升高。病理浓度的TSP1抑制了体外和体内淋巴管生成。机制上，TSP1抑制VEGF-C诱导的LEC中AKT和eNOS激活，并减弱NO产生。此外，LEC中CD47沉默阻止了TSP1对淋巴管生成AKT-eNOS信号和淋巴管生成的效应。注射动脉粥样硬化倾向AAV8-PCSK9的LEC特异性Cd47敲除小鼠（Cd47ΔLEC）与对照小鼠（Cd47WT）相比，主动脉和主动脉根部的动脉粥样硬化减少。然而，未观察到代谢参数包括体重、血浆总胆固醇水平和空腹血糖的差异。对主动脉根部横截面进行的额外免疫染色实验表明，与对照组相比，Cd47ΔLEC小鼠的淋巴管密度更高。结论：这些发现表明TSP1通过激活LEC中的CD47抑制淋巴管生成，并且LEC Cd47缺失减弱动脉粥样硬化病变形成。总之，这些结果确定LEC CD47是动脉粥样硬化的潜在治疗靶点。