巴瑞替尼通过直接抑制成纤维细胞和内皮细胞外泌体介导的旁分泌信号改善皮肤纤维化

背景 弥漫性皮肤系统性硬化症（dcSSc）迫切需要新的治疗方法。异常的JAK/STAT信号驱动纤维化，但JAK抑制剂对血管病理的影响以及与内皮细胞来源外泌体的潜在协同作用仍不清楚。 方法 利用博来霉素（BLM）诱导的人皮肤成纤维细胞（HSF）活化和缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）模型，我们研究了JAK1/JAK2抑制剂巴瑞替尼的抗纤维化机制。功能实验评估了增殖、迁移、管形成、细胞外基质（ECM）沉积和细胞因子产生。将巴瑞替尼处理的HUVEC的条件培养基（CM）和外泌体应用于BLM-HSF，以评估旁分泌/外泌体的作用。 结果 巴瑞替尼（6 nmol/L）直接抑制BLM诱导的HSF增殖、Collagen I/III、α-SMA表达和肌动蛋白聚合。在缺氧损伤的HUVEC中，巴瑞替尼（54 nmol/L）恢复了增殖、迁移、管形成，并抑制了JAK/STAT3过度活化。重要的是，巴瑞替尼处理的HUVEC的条件培养基显著减弱了BLM-HSF的纤维化活化，而外泌体抑制剂GW4869可消除这种效果。与对照外泌体相比，巴瑞替尼处理的HUVEC的外泌体表现出增强的HSF摄取和对增殖、细胞骨架重组及促纤维化标志物表达的更优抑制；这些作用在外泌体破坏后减弱。 结论 巴瑞替尼通过双重机制减轻皮肤纤维化：直接抑制成纤维细胞活化和通过“重编程”HUVEC来源外泌体间接缓解。通过挽救内皮功能障碍和增强内皮外泌体的抗纤维化货物，巴瑞替尼中断了dcSSc中的血管损伤-纤维化循环。这确定内皮外泌体是JAK抑制剂疗效的关键介质，提供了一种新的治疗范式。