TWIST相关蛋白1通过调控肌细胞增强因子2A的稳定性促进瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子β受体1的表达

背景：瘢痕疙瘩是一种纤维增生性疾病，由基因异常激活引起，其潜在机制仍不清楚。碱性螺旋-环-螺旋转录因子TWIST相关蛋白1（TWIST1）在组织发育和疾病过程中控制细胞增殖和分化。在本研究中，我们旨在阐明TWIST1在瘢痕疙瘩发病中的重要作用。方法：采用免疫组织化学、细胞计数试剂盒-8实验、Western blotting、PCR、Matrigel侵袭实验和免疫荧光实验来证明TWIST1在来自正常皮肤和瘢痕疙瘩的成纤维细胞中的作用和机制。采用质谱、泛素化实验、染色质免疫沉淀和双荧光素酶报告基因实验来探索TWIST1与下游分子的相互作用。结果：在本研究中，我们证实TWIST1在患者瘢痕疙瘩组织和瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞（KFBs）中上调。在体外，抑制TWIST1可阻止KFB的增殖、侵袭和活化。我们还发现了TWIST1与转化生长因子β（TGF-β）信号相关分子TGF-β受体1（TβR1）、SMAD家族成员2（Smad2）和Smad3，以及纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白、I型胶原和III型胶原在KFB中的联系。机制上，我们发现了一种全新机制，TWIST1与肌细胞增强因子2A（MEF2A）相互作用并抑制其泛素化和降解。通过染色质免疫沉淀和双荧光素酶报告基因实验，TβR1被确定为MEF2A的新下游靶标，其直接结合TβR1启动子。TWIST1的过表达促进了MEF2A向TβR1启动子的募集，并恢复了TβR1的功能性表达。结论：我们的研究强调了TWIST1在瘢痕疙瘩及其相关成纤维细胞发展中的重要作用，部分通过升高的MEF2A依赖性TβR1表达介导。在KFB中阻断TWIST1的表达可能为瘢痕疙瘩的治疗开辟新的途径。