抗HER2×CCR4双特异性抗体通过趋化因子阻断和耗竭肿瘤相关调节性T细胞增强晚期HER2阳性肿瘤的抗肿瘤免疫，且不诱导全身毒性

背景 CCR4+调节性T细胞(Tregs)广泛存在于外周循环和肿瘤微环境中，通过趋化因子驱动的方式浸润人表皮生长因子受体2阳性(HER2+)肿瘤，促进肿瘤免疫逃逸。然而，靶向CCR4的疗法(如mogamulizumab)用于全身性Treg耗竭可能会带来显著毒性，并且迄今仅限于血液恶性肿瘤。值得注意的是，肿瘤趋化性外周Tregs——肿瘤浸润性Tregs(TIL-Tregs)的关键前体——仍然被忽视。方法 我们设计并表达了四种候选抗HER2×CCR4 DVD-Ig双特异性抗体，其抗CCR4结构域具有不同程度的掩蔽，而抗HER2结构域完全暴露，以优先耗竭肿瘤相关Tregs，包括TIL-Tregs和肿瘤趋化性外周Tregs。在体外评估了稳定性和抗肿瘤活性。在人类免疫系统重建的NOG小鼠中，我们系统地：(1)对XL-11进行了全面的剂量反应评估，以表征其药理学功效和潜在全身毒性；(2)评估了免疫记忆；(3)研究了XL-11与程序性细胞死亡蛋白-1/程序性死亡配体-1(PD-1/L1)阻断剂的协同作用；(4)分析了药代动力学特征(PK)。结果 与HER2相比，较低的CCR4亲和力使抗HER2×CCR4 DVD-Igs能够优先靶向TIL-Tregs，并且与mogamulizumab相比，减少对外周Tregs的结合。抗HER2×CCR4 DVD-Igs抑制Treg向肿瘤微环境的趋化，并通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性杀伤Tregs和HER2+肿瘤细胞。在候选分子中，XL-11的抗CCR4结构域暴露程度最高，因其优越的稳定性和有效的抗肿瘤活性而被选择用于体内评估。在胃癌和乳腺癌的体内模型中，XL-11通过减少TIL-Tregs并增加CD8+/Tregs比率，即使在晚期也能诱导有效的抗肿瘤活性，且没有转移迹象。同时，XL-11特异性耗竭肿瘤趋化性外周Tregs，进一步增强抗肿瘤免疫，同时避免即使在高剂量(10 mg/kg)下也减少全身Tregs。记忆T细胞没有增加。此外，XL-11增强了抗PD-1抗体的抗肿瘤活性，并显示出优越的PK特性。结论 XL-11在晚期HER2+肿瘤中介导有效的抗肿瘤免疫，同时避免全身Tregs减少。XL-11还与抗PD-1治疗协同作用，并表现出良好的稳定性和PK，支持临床转化。这项工作推进了HER2+肿瘤中Treg靶向治疗，并克服了mogamulizumab的治疗局限。