角膜上皮来源的Netrin-1通过调控树突状细胞活化缓解干眼病

目的：利用干眼病(DED)小鼠模型，研究角膜上皮源性netrin-1(NTN-1)的表达及其在干眼病中的免疫调节功能。 方法：我们通过东莨菪碱处理下的干燥应激建立DED小鼠模型。采用RNA测序技术鉴定DED小鼠角膜上皮中的差异表达基因(DEGs)。通过实时PCR、免疫荧光染色和免疫印迹分析NTN-1的表达。随后用重组NTN-1或中和抗体处理DED小鼠，以研究疾病严重程度、树突状细胞(DC)活化和炎症细胞因子的表达。 结果：在DED小鼠角膜上皮中共鉴定出347个DEGs（292个上调，55个下调）：与对照组相比，DED小鼠角膜上皮源性NTN-1表达显著降低。局部应用重组NTN-1可减轻疾病严重程度，同时恢复泪液分泌和杯状细胞密度。此外，NTN-1减少了DC数量，抑制了DC和Th17细胞的活化，并降低了DED小鼠炎症因子的表达。相反，使用抗NTN-1抗体阻断内源性NTN-1活性会加重疾病，增强DC活化，并上调DED小鼠结膜中的炎症因子。 结论：我们发现DED小鼠角膜上皮中NTN-1表达降低。我们的研究结果阐明了NTN-1在缓解DED和抑制DC活化中的作用，从而表明其在抑制DED眼表炎症方面具有治疗潜力。