抑制热休克蛋白B8通过抑制自噬缓解小鼠轴突损伤中的视网膜功能障碍和神经节细胞丢失

目的：热休克蛋白B8（HspB8）在许多病理过程中可迅速上调，但其在创伤性视神经病变中的作用尚不清楚。在本研究中，我们利用视神经挤压（ONC）模型探讨了自噬在HspB8效应中的作用。方法：雄性C57BL/6J小鼠经玻璃体腔注射重组腺相关病毒2型（AAV2-shHspB8或AAV2-GFP），随后用自闭合镊子进行ONC。使用Western blot和免疫组织化学染色评估HspB8的表达。我们进行视网膜铺片免疫荧光检测视网膜神经节细胞（RGCs）的数量，并使用全视野闪光视网膜电图（ff-ERG）和视动反应（OMR）评估视网膜功能。通过Western blot、免疫组织化学染色和透射电子显微镜（TEM）图像反映自噬水平。我们还应用3-甲基腺嘌呤（3MA）和雷帕霉素（Rapa）来调节视神经损伤中的自噬水平。结果：ONC刺激HspB8表达。ONC引起的RGCs和ff-ERG b波振幅的下降可通过HspB8下调得到缓解。观察到ONC后自噬活性增加；然而，这种变化可通过玻璃体腔注射AAV2-shHspB8逆转。此外，自噬抑制剂3MA的应用具有与AAV2-shHspB8相同的神经保护作用，如ff-ERG和RGCs数量所示。同时，AAV2-shHspB8的保护作用被自噬激活剂Rapa削弱。结论：抑制小鼠视神经损伤中的HspB8具有神经保护作用，这可能源于其对自噬的下调。关键词：热休克蛋白B8，视网膜神经节细胞，视网膜电图，自噬，神经保护