δ-阿片类药物对人视神经头星形胶质细胞中组蛋白去乙酰化酶的调节

目的：我们确定δ-阿片受体激动剂（SNC-121）是否通过控制视神经头（ONH）星形胶质细胞中的组蛋白去乙酰化酶（HDACs）活性和表达来调节乙酰化稳态。方法：用SNC-121（1 µM）处理ONH星形胶质细胞24小时。使用HDAC特异性荧光团偶联合成底物Boc-Lys(Ac)-AMC和Boc-Lys(Tfa)-AMC测量HDAC活性。通过Western blotting和定量实时PCR测定每种HDAC的蛋白质和mRNA表达。通过向大鼠的巩膜静脉注射2.0 M高渗盐水来升高IOP。结果：δ-阿片受体激动剂SNC-121（1 µM）处理使组蛋白H3、H2B和H4的乙酰化分别增加128 ± 3%、45 ± 1%和68 ± 2%。添加Garcinol（一种组蛋白乙酰转移酶抑制剂）完全阻断了SNC-121诱导的组蛋白H3乙酰化。SNC-121显著降低了I类和IIb类HDAC的活性（17 ± 3%），这种HDAC活性的降低被选择性δ-阿片受体拮抗剂纳曲吲哚完全阻断。SNC-121还使HDAC-3和HDAC-6的mRNA表达分别降低了19%和18%。此外，SNC-121处理显著降低了HDAC 1、2、3和6的蛋白表达（P < 0.05）。SNC-121处理还减少了脂多糖诱导的ONH星形胶质细胞TNF-α的产生，以及高眼压动物视神经中的胶质纤维酸性蛋白免疫染色。结论：我们提供的证据表明，δ-阿片受体激动剂激活增加了组蛋白乙酰化，降低了I类和IIb类HDAC的活性、mRNA和蛋白质表达，以及ONH星形胶质细胞中脂多糖诱导的TNF-α产生。我们的数据还表明，SNC-121治疗减少了高眼压动物视神经中的胶质纤维酸性蛋白免疫染色。