RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 人间充质干细胞无异种源完全培养基应用案例

案例 1：在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 培养基中培养冷冻保存 20 年的 hMSCs

图 1：冷冻保存的 hMSCs 在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中的生长

一支冷冻保存的 hMSCs 样品在液氮气相中储存 20 年后进行解冻。细胞接种于 VitroPrime™ Spread-Attach 纤连蛋白包被的 24 孔板中，并置于低氧培养箱（6% O₂）中培养。

培养 48 小时后更换培养基；培养至 72 小时时，将培养板置于 IncuCyte S3 活细胞分析系统中，此后每 4 小时扫描一次，以持续监测并记录细胞的生长情况。

 

案例 2：TrypLE 消化传代后 hMSCs 在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中的生长

图 2：TrypLE 消化传代后的 hMSCs 在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中的生长

在纤连蛋白（Fibronectin）包被的 T75 培养瓶中培养 hMSCs，使用 TrypLE 进行消化传代。随后将细胞接种于纤连蛋白包被的 24 孔 VitroPrime™ Spread-Attach 培养板中，接种密度为 10,000 个细胞/孔（约 5,000 个细胞/cm²）。

接种后立即将培养板置于 IncuCyte S3 中，并持续成像监测 163 小时；期间每 48 小时更换一次培养基。

 

案例 3：TrypLE 消化传代后 hMSCs 在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中的实时动态生长

图 3：TrypLE 消化传代后 hMSCs 在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中的实时动态生长

在纤连蛋白（Fibronectin）包被的 T75 培养瓶中培养 hMSCs，使用 TrypLE 进行消化传代，然后将细胞接种于纤连蛋白包被的 24 孔 Spread-Attach 培养板中，接种密度为 10,000 个细胞/孔（约 5,000 个细胞/cm²）。

接种后立即将培养板置于 IncuCyte S3 中，并持续成像监测 163 小时，期间每 48 小时更换一次培养基。

共采集 93 张图像，并以每秒 5 帧（5 fps）的速度合成为 MP4 延时摄影视频。视频左下角显示的比例尺为 800 μm。

 

案例 4：TrypLE 消化传代后的 hMSCs 在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中不同细胞外基质（ECM）上的生长

图 4：TrypLE 消化传代后的 hMSCs 在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中不同细胞外基质（ECM）上的生长

将 hMSCs 从纤连蛋白（Fibronectin）包被的 T75 培养瓶中消化传代后，分别接种于以下不同处理的 12 孔 VitroPrime™ Spread-Attach 培养板：

• 未包被（Uncoated）

• Vitronectin 包被：10 μg/mL

• Fibronectin 包被：10 μg/mL

细胞培养 72 小时后，使用 IncuCyte S3 进行成像分析。

 

案例 5：在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中培养的 hMSCs 的免疫染色

图 5：RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 培养的 hMSCs 的免疫染色

将 hMSCs 接种于纤连蛋白（Fibronectin，10 μg/mL）包被的 24 孔 VitroPrime™ Spread-Attach 培养板中。培养 6 天后，对细胞进行标准的免疫荧光染色，并使用带有荧光标记的直接标记抗体进行染色：

• CD90-FITC

• CD105-PE

• CD73-APC

随后使用 Leica MICA 共聚焦显微镜对染色结果进行观察和记录。

 

案例 6：RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 培养的 hMSCs 三系分化

 

图 6：RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 培养的 hMSCs 三系分化

将 hMSCs 接种于纤连蛋白（Fibronectin，10 μg/mL）包被的 24 孔 VitroPrime™ Spread-Attach 培养板中。在 RocketCell™ hMSC Complete Growth Medium, XF 中扩增培养 6 天后，将细胞分别置于成脂、成软骨和成骨分化培养基中培养 12 天。

随后对细胞进行固定，并采用标准的显色染色方法进行检测：

• Oil Red O（油红 O）：用于检测脂肪细胞（成脂分化）

• Alcian Blue（阿利新蓝）：用于检测软骨细胞/软骨组织（成软骨分化）

• Alizarin Red（茜素红）：用于检测骨细胞/成骨分化

染色结果使用 Keyence BZX 显微镜进行观察和记录。