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江苏乐赛生物科技有限公司
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江苏乐赛生物科技有限公司
入驻年限：5 年
- 联系人：
王俊豪
- 所在地区：
江苏 苏州市
- 业务范围：
试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材、书籍 / 软件、实验室仪器 / 设备、论文服务、原辅料包材、医疗器械、体外诊断
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科研机构 代理商 经销商 生产厂商
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技术资料/正文
大体积样本外泌体提取试剂盒（亲和层析法）
436 人阅读发布时间：2022-07-20 15:58
【原理】
本试剂盒基于磷脂酰丝氨酸（PS）高结合力的多孔微球的纯化方式。样本在适宜的结合缓冲液（BB）作用下，其中外泌体吸附在多孔微球的表面，而其他非磷脂类 的蛋白质等杂质则不被吸附而去除。吸附了外泌体的多孔微球经洗涤液（WB）洗涤去除蛋白质、杂质和盐分，最后经洗脱液（EB）洗脱而获得外泌体。
【使用方法】
1、实验前准备
1.1实验开始前将样本平衡到室温，检查试剂盒包装及组成成分数量是否完好。
1.2 血清/血浆样本用生理盐水稀释5倍后使用。样本经4℃，10000g离心10分钟后取上清液备用，或者使用0.45μm滤膜过滤后取滤液备用。
2、外泌体提取
2.1 在合适体积的无菌三角瓶中，收集22.5mL试验前处理样品，加入2.5mL结合缓冲液（BB，10×）,轻柔混合均匀，室温放置10分钟。
2.2 将层析柱置于铁架台上，下方放置液体收集器皿，开启层析柱上盖和下帽，让液体自然流出，分次加入步骤
2.1中得到的样品混合液，让所有样本混合液通过层析柱。
2.3 层析柱中加入3mL洗涤液（WB），让液体自然流出，重复操作，共洗涤3次。
2.4 层析柱中加入1mL洗脱液A （EB-A），待液体将要滴出时，加盖层析柱下帽，室温放置10分钟。取下层析柱下帽，收集液体到新的无菌管中。
2.5 收集管中加入1mL洗脱液B（EB-B），轻柔混匀后编号，收集管中即为纯化的外泌体，可用于后续实验或者-80℃冻存。