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王俊豪
江苏 苏州市
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技术资料/正文
222 人阅读发布时间:2022-09-08 14:53
外泌体是一类源于内体的细胞外囊泡,通常直径为30-150纳米,含有来自原始细胞的蛋白质、mRNA、DNA等物质。大多数细胞会释放外泌体,包括一些被细胞壁包围的细菌,真菌和植物细胞。


外泌体因其潜在的治疗和诊断应用而受到普遍关注。最初研究学者认为外泌体只是细胞代谢的产物,然而现在人们知道它们的功能已经远远超出了代谢产物的范畴。
外泌体主要作用机制就是将相关的核酸药物转移到受体细胞,从而影响蛋白质机制。越来越多的证据支持这一观点,比如在受体细胞中发现了完整的、外泌体携带的RNA,某些RNA结合蛋白也被确认为可能在RNA向靶细胞的转移中起作用。
外泌体也可作为潜在的生物标志物,因为其内容是其起源细胞的分子特征。由于脂质双层,外泌体内容物相对稳定,并受到外部蛋白酶和其他酶的保护,使其成为有吸引力的诊断工具。
外泌体的分离纯化一直是科研工作者关注的问题,常用外泌体分离方法包括超速离心法、聚合物沉淀法、超滤法及磁珠特异捕获法等。

亲和层析法采取的是基于多孔材料、可与磷酯酰丝氨酸可逆结合洗脱、与外泌体高亲和力的大孔径材料纯化方式,最多一次可纯化外泌体样1.5L,国家专利公开号:CN114164203A。同时针对样本量较小的科研、药研用户,我们推出如沉淀法、磁珠法和微球法等多种不同的纯化方式,满足各类客户需求。
大体积样本外泌体提取试剂盒(亲和层析法)
适合样本量较大的外泌体提取
原理:
亲和层析捕获法是基于多孔材料与磷脂酰丝氨酸(PS)的可逆结合洗脱,乐赛生物采用与外泌体高亲和力的大孔径材料的纯化方式。在结合缓冲液(EV-SB)的作用下外泌体特异的吸附在多孔材料的表面,而其他非磷脂蛋白质等杂质则不被吸附而去除。吸附了外泌体的多孔材料经洗液洗涤去除蛋白质和杂质,最后,纯化的外泌体被EB洗脱液洗脱。
特性:
►目前市场上尚未见同类亲和纯化产品。
►特有的PS可逆结合材料包裹多孔材料
►比表面积:120m2/g
►密度:0.95g/cm3
►粒径:45 μm
►回收率:≥90%
目前市场上大体积外泌体纯化的策略主要有两种:
1.采用切向流方式超滤,通过不同孔径的膜来浓缩样本外泌体,由于是物理过滤,所以只要是大于孔径的蛋白和其他可溶物都会被浓缩下来,会造成外泌体不纯,切向流也会对外泌体有机械剪切损伤,导致外泌体回收率会降低。
2.排阻色谱柱方式,排阻色谱树脂柱类似于分子筛的原理,大粒径的分子或者囊泡会先流出,小粒径的分子和囊泡会进入树脂球延迟而后流出,通过粒径的截流来分离合适大小的外泌体,因为外泌体不是一种粒径,是不同粒径的混合物,排阻色谱柱会损失一部分外泌体,同时相同粒径的分子和可溶物也会被收集,由于不是亲和结合,所以没有浓缩的功能,最终液体样本纯化后体积变化不大,达不到浓缩的目的。
竞争优势:
采用45μm大孔径微球包裹磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合材料,推出了外泌体固相纯化试剂盒,1g亲和纯化填料至少可结合500mL样本的外泌体,纯化得率可达90%以上,洗脱后外泌体纯度高,无螯合剂等试剂掺入,对后续实验影响较小。
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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E04-1 |
大体积样本外泌体提取试剂盒 |
22.5mL样本一次提取/盒 |
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E04-20 |
22.5mL样本20次提取/盒 |
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E05-2 |
225mL样本2次提取/盒 |
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E06-1 |
450mL样本一次提取/盒 |
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E01-1 |
外泌体提取试剂(沉淀法) |
1 mL |
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E01-5 |
外泌体提取试剂(沉淀法) |
5 mL |
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E02-10 |
外泌体提取试剂(微球法) |
10次500uL样本 |
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E03-10 |
外泌体提取试剂(磁珠法) |
10次500uL样本 |
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E08-1 |
牛奶来源外泌体,提取后约 1*10^8个/mL |
5*1毫升 |
以上产品由乐赛生物提供产品试用装。
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