选择激发波长和荧光波长的方法
966 人阅读发布时间:2024-07-08 15:14
激发波长和发射波长的区别
在进行选择之前,需要了解激发波长和发射波长的区别。判断方法不同,激发波长是用某种波长的光激发出荧光,这种波长的光可以是紫外光或者可见光也可以是其他光。发射波长是指某种光发射出来的荧光的波长,一般的可见光的波长用肉眼就能大致判断出来。分辨率不同,激光波长对于杂散光和信噪比的影响非常明显,当狭缝的宽度不变时,用氩激光稍大波长激发样品,杂散光可能会小一些,且分辨率会有所提高。发射光谱是指光源所发出的光谱。当发生连续光谱光源的光通过某一种吸收物质时,通过光谱仪就可以得到吸收光谱。吸收光谱是指在连续发射光谱背景中所呈现出的暗线。用途不同,激发光谱可以分析在不同激发波长下,物质的特定波长荧光的强度变化。荧光激发光谱的形状与发射波长无关。发射光谱是固定激发波的波长,测定发射光强度与波长(有时候也测波数或者频率等)的关系。
选择激发波长和荧光波长的方法
激发波长和发射波长是分子荧光光谱测量的重要参数,它的选择影响分子荧光光谱的测量和后续研究的准确性。
先固定发射波长,测定激发光谱;
再固定激发波长,测定发射光谱;
一般选择在较大激发波长和较大发射波长进行物质测定。
可以利用指示克立格法确定激发波长和发射波长。