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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
百欧泰
- 服务名称:
兔多克隆抗体制备服务
服务简介
拥有专业的抗体研发生产团队,经验丰富的抗体制备技术人员、完善的抗体生产设施、先进的抗体制备技术,可为客户提供兔多克隆抗体制备服务,包括抗原生产,抗体制备,抗体纯化,抗体标记,抗体修饰等,客户也可以根据自己的需求选择适合自己的服务方案。
样品要求
1 客户可提供制备抗体所需蛋白或多肽片段,抗原纯度>85%,数量>10mg,浓度>1mg/ml。
2 客户提供蛋白抗原的英文全称、种属信息、GeneID或序列信息;化合物抗原应提供化学结构式、活性基团、溶解性等信息。
多克隆抗体是由多个B淋巴细胞克隆所产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗体。
北京百欧泰生物技术有限公司拥有专业的抗体研发生产团队,可为客户提供包含抗原设计—多肽合成、蛋白表达—动物免疫—抗体纯化—抗体标记—免疫学检测等项目的一站式抗体制备服务。根据客户具体实验需要,可以提供小鼠、兔、大鼠、鸡、羊等多种动物种属的多克隆抗体制备服务,制备的多克隆抗体能够用于ELISA 、Western Blot、IHC、IF、IP等多种应用。
百欧泰生物还可提供抗体标记、抗体对筛选、试剂盒开发、免疫学检测等增值服务。
服务内容
客户可提供抗原用于制备多克隆抗体,抗原包含:天然蛋白、重组蛋白、细胞或细胞提取液、病毒或病原体、菌种或菌体蛋白、小分子多肽、化合物;其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶联载体蛋白。
客户可提供蛋白名称、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息,我公司根据客户的实验需求设计抗原,合成多肽抗原或表达蛋白抗原,免疫动物制备多克隆抗体。
样品要求
1 客户提供制备抗体所需蛋白或多肽片段,抗原纯度>85%,数量>10mg,浓度>1mg/ml。
2 客户提供的抗原信息应包含蛋白抗原的英文全称、种属信息、GeneID 核酸序列或氨基酸序列信息;化合物抗原应提供化学结构式、活性基团、溶解性等信息。
技术流程
1 常规多克隆抗体制备
周期 BIOFW046-1 BIOFW046-2
3-4周 客户提供抗原 客户提供蛋白序列,百欧泰生物蛋白表达
10周 免疫动物(2只新西兰兔) 免疫动物(2只新西兰兔)
每增加免疫动物1只,需加收费用;
三次免疫后进行效价检测 ELISA效价>1:100000
1周 采集血清;
纯化抗体IgG(protein A/免疫亲和层析纯化);
剩余血清分装后冷冻抽干。
提供产品 免疫前血清1 ml;
25-50 ml兔抗原血清 ;
10 mg protein A亲和层析纯化抗体IgG 免费按客户要求分装 , 或免疫亲和层析纯化抗体IgG 1-3mg,如果客户需要可以冷冻抽干(便于长期保存),添加防腐剂及蛋白稳定剂等;
未偶联多肽抗原或重组蛋白;
实验报告
2 应用于特定实验多克隆抗体制备(WB、IHC、FCM、中和抗体等)
客户需提供制备抗体对应目的蛋白的英文全称、种属信息、GeneID或序列信息
周期 BIOFW046-3
2周 抗原表位分析
选取三条特异性多肽合成
载体蛋白偶联
10周 三个多肽抗原分别单独免疫
三次免疫后进行效价检测 ELISA效价>1:100000
1周 三只动物分别采集全部血清30-50ml/只兔子
纯化抗体IgG(protein A/免疫亲和层析纯化)
剩余血清分装后冷冻抽干
1周 特定实验应用检测:WB检测、IHC/IF检测、FCM检测
提供产品(3个抗体) 免疫前血清1 ml;
25-50 ml兔抗原血清 ;
10 mg protein A亲和层析纯化抗体IgG 免费按客户要求分装 , 或免疫亲和层析纯化抗体IgG 1-3mg,
未偶联多肽抗原或重组蛋白;
实验报告
注:客户需要提前提供检测实验所需的组织、蛋白、细胞等样品。
百欧泰生物还可根据客户需求提供下列服务:
1.抗体标记:酶标记、生物素标记、荧光素标记、胶体金标记等
2.制备抗体亲和层析柱(客户用于提纯蛋白)
3.抗体对筛选,试剂盒开发
服务说明
1、 由于免疫抗原的多样性,对于合成困难的多肽和表达困难的蛋白,或免疫原性较差的抗原,双方可商议确制备周期和制备费用。
2、由于动物免疫与多重因素有关,因此制备得到的多克隆抗体具有一定的不确定性,常规多克隆抗体制备只对得到的抗体与制备抗体所用的抗原之间的相互结合负责,不对该抗体的其他应用负责。如果客户需要制备抗体应用于特定实验,请选择多克隆抗体制备BIOFW046-3
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文献和实验【实验 目的 】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验 原理 】 当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体
制备多克隆抗体的佐剂 如用可溶性蛋白质抗原免疫家兔或山羊,在加用佐剂时一次注入量一般为0.5~1mg/kg。如不加佐剂,则抗原剂量应加大10~20倍。佐剂有福氏(Freund’s)佐剂、脂质体佐剂、氢氧化铝佐剂、明矾佐剂以及免疫刺激复合物(immune stimulating complex,ICOM)等。 其中最常用的是福氏佐剂,根据其组成分为完全福氏佐剂(CFA)和不完全福氏佐剂(IFA)两种。IFA通常由羊毛脂1份、石腊油5份组成,每毫升IFA中
。在三次免疫后,可以获得较高效价的抗体,每次取血量可以在40ml,不要取太多,否则会造成兔子贫血。最后一次取血可以采用颈动脉放血,具体操作如下: 1、家兔仰卧于兔架上固定头部,用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤 2、沿颈部中线用手术刀切开皮肤约10cm,分离皮下结缔组织,直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作,如碰到小血管出血,可用止血钳止血) 3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松组织,暴露出颈总动脉后用弯头眼科镊使之游离,剥离神经和结缔组织 4、于动脉
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