免疫组织化学(IHC)
434 人阅读发布时间:2021-08-13 10:17
研究对象:所有能作为抗原或者半抗原的物质,如蛋白质、多肽、核算、酶、激素、磷脂、多糖以及病原体等。
优势:高度特异性,敏感性高,方法步骤统一,形态、功能和代谢密切结合等突出的优势现已成为临床病理不可或缺的辅助手段,尤其是根据该技术检测结果的表达水平所发展起来的相关“个体化治疗”方案,使免疫组化的质量及质控管理愈来愈受到高度重视。
免疫组织化学的四大基本类型
1.直接法之传统直接法VS新型直接法
传统直接法将已知的特异性抗体与标记物结合,制备成标记抗体,再用标记抗体直接与标本内的相应抗原结合,光镜下观察抗原存在部位呈现特异性标记。优点: 特异性强,非特异性反应较少,技术操作简便。缺点: 必须标记每一种特异性抗体,且只能检测一种抗原,敏感性较差,同时反应的信号也较小,特别是对于组织或细胞内微量的抗原检测。
新型直接法采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和HRP结合在骨架上,形成HRP-葡聚糖-特异性抗体的巨大复合物,其内的特异性抗体直接与标本内的相应抗原结合,经酶促反应,即可在光镜下观察特异性阳性结果,也叫多聚螯合物酶法——EPOS法(Enhanced Polymer One-step Stainning)。优点: 敏感性极强,背景无染色,大大缩短了试验时间,是目前最简便的免疫组织化学方法,用于冰冻切片作用尤为突出。缺点: 商品化的EPOS品种不多,试剂价格较昂贵。
