- 移动端
普健生物（武汉）科技有限公司品牌商
13 年
手机商铺
商家活跃：
产品热度：
- NaN
- 0
- 0
- 2
- 2
自营
AtaGenix
抗体/试剂/技术服务/细胞库 / 细胞培养
已认证品牌介绍
普健生物(武汉)科技有限公司由中法科学家于2011年联合成立于武汉，作为ProteoGenix在中国的研发生产基地，总面积4700平方米，其中GMP级别细胞房800平方米，配置一个100平方米的无菌、无内毒素纯化实验室;仪器设备投入逾2000万。作为武汉国家生物产业基地指定的光谷抗体发现与筛选公共服务平台，普健生物具备领先的技术实力和国际化发展的战略格局，专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。公司立足于生命科学领域，自主建立生命科学研究平台、诊断原料开发平台、抗体药物研发平台，三大完善的技术服务平台：生命科学平台：拥有五大成熟高效的蛋白表达系统(哺乳动物细胞、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母、昆虫细胞)，可提供蛋白表达、分子构建-蛋白表达纯化-结构解析、抗体重组表达、鼠/兔单克隆抗体制备以及相关检测服务；诊断原料开发平台：拥有开放式全自动化学发光平台，可缩短研发周期、降低开发成本与技术风险，为广大客户提供各种诊断核心原料开发；抗体药物发现平台以single B细胞抗体发现技术，杂交瘤筛选与噬菌体展示技术为主，目前已完成构建并对外提供抗体筛选技术服务的文库有：新冠特异性抗体噬菌体文库、羊驼天然纳米抗体噬菌体文库、兔源天然抗体噬菌体文库、小鼠天然抗体噬菌体文库、另外可为客户提供鼠/兔/鸡/猪/猫/狗等物种免疫噬菌体抗体文库构建及筛选服务。
自营
ProteoGenix
抗体/试剂/技术服务
已认证品牌介绍
ProteoGenix成立于2003年，致力于开发诊断试剂和生物治疗药物，以靶向其创始人发现的关键蛋白质。ProteoGenix的管理团队迅速认识到高质量抗体和蛋白质对于生物制药产品开发的重要性，并认识到它们在进入临床应用中的巨大潜力。ProteoGenix开发的生物分子的独特特性，使其能够成功克服进入临床应用过程中的诸多挑战。凭借在治疗性抗体和定制试剂方面的深厚经验，ProteoGenix迅速在生命科学领域建立了声誉。作为主要的合同研究组织(CRO)和生物制药领域的可信赖合作伙伴，ProteoGenix在显著提升生物分子进入IND申请的成功率方面取得了卓越成就。作为服务集成商，ProteoGenix全程引导客户从早期发现到临床应用。ProteoGenix的核心目标是从一开始就洞察生物分子的未来需求，并据此制定科学的开发策略。ProteoGenix提供广泛的创新解决方案和技术，依托超过15年的行业经验和稳固的国际地位，ProteoGenix在以下六大服务领域提供独特且定制化的服务：l 抗体工程(人源化、双特异性抗体、ADC、亲和力成熟、分子优化)生物工艺开发(无知识产权限制的稳定细胞系开发、发酵及生物反应器生产优化)单克隆和多克隆抗体开发(杂交瘤法和噬菌体展示)重组蛋白和抗体生产(大肠杆菌、枯草杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞)基因合成肽合成ProteoGenix的研发实验室始终以创新为导向，通过不断优化技术流程，例如XtenCHOTM，一种瞬时表达细胞系，其生产效率超过了业界标杆ExpiCHO。此外，ProteoGenix还拥有一个包含超过20万种产品的广泛产品目录。产品涵盖抗体、蛋白质、ELISA试剂盒、细胞分离介质、核酸纯化试剂盒等，满足生命科学领域多样化的需求。
自营
AtaGenix
抗体/试剂/技术服务/细胞库 / 细胞培养
已认证品牌介绍
普健生物(武汉)科技有限公司由中法科学家于2011年联合成立于武汉，作为ProteoGenix在中国的研发生产基地，总面积4700平方米，其中GMP级别细胞房800平方米，配置一个100平方米的无菌、无内毒素纯化实验室;仪器设备投入逾2000万。作为武汉国家生物产业基地指定的光谷抗体发现与筛选公共服务平台，普健生物具备领先的技术实力和国际化发展的战略格局，专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。公司立足于生命科学领域，自主建立生命科学研究平台、诊断原料开发平台、抗体药物研发平台，三大完善的技术服务平台：生命科学平台：拥有五大成熟高效的蛋白表达系统(哺乳动物细胞、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母、昆虫细胞)，可提供蛋白表达、分子构建-蛋白表达纯化-结构解析、抗体重组表达、鼠/兔单克隆抗体制备以及相关检测服务；诊断原料开发平台：拥有开放式全自动化学发光平台，可缩短研发周期、降低开发成本与技术风险，为广大客户提供各种诊断核心原料开发；抗体药物发现平台以single B细胞抗体发现技术，杂交瘤筛选与噬菌体展示技术为主，目前已完成构建并对外提供抗体筛选技术服务的文库有：新冠特异性抗体噬菌体文库、羊驼天然纳米抗体噬菌体文库、兔源天然抗体噬菌体文库、小鼠天然抗体噬菌体文库、另外可为客户提供鼠/兔/鸡/猪/猫/狗等物种免疫噬菌体抗体文库构建及筛选服务。
自营
ProteoGenix
抗体/试剂/技术服务
已认证品牌介绍
ProteoGenix成立于2003年，致力于开发诊断试剂和生物治疗药物，以靶向其创始人发现的关键蛋白质。ProteoGenix的管理团队迅速认识到高质量抗体和蛋白质对于生物制药产品开发的重要性，并认识到它们在进入临床应用中的巨大潜力。ProteoGenix开发的生物分子的独特特性，使其能够成功克服进入临床应用过程中的诸多挑战。凭借在治疗性抗体和定制试剂方面的深厚经验，ProteoGenix迅速在生命科学领域建立了声誉。作为主要的合同研究组织(CRO)和生物制药领域的可信赖合作伙伴，ProteoGenix在显著提升生物分子进入IND申请的成功率方面取得了卓越成就。作为服务集成商，ProteoGenix全程引导客户从早期发现到临床应用。ProteoGenix的核心目标是从一开始就洞察生物分子的未来需求，并据此制定科学的开发策略。ProteoGenix提供广泛的创新解决方案和技术，依托超过15年的行业经验和稳固的国际地位，ProteoGenix在以下六大服务领域提供独特且定制化的服务：l 抗体工程(人源化、双特异性抗体、ADC、亲和力成熟、分子优化)生物工艺开发(无知识产权限制的稳定细胞系开发、发酵及生物反应器生产优化)单克隆和多克隆抗体开发(杂交瘤法和噬菌体展示)重组蛋白和抗体生产(大肠杆菌、枯草杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞)基因合成肽合成ProteoGenix的研发实验室始终以创新为导向，通过不断优化技术流程，例如XtenCHOTM，一种瞬时表达细胞系，其生产效率超过了业界标杆ExpiCHO。此外，ProteoGenix还拥有一个包含超过20万种产品的广泛产品目录。产品涵盖抗体、蛋白质、ELISA试剂盒、细胞分离介质、核酸纯化试剂盒等，满足生命科学领域多样化的需求。
自营
AtaGenix
抗体/试剂/技术服务/细胞库 / 细胞培养
已认证品牌介绍
普健生物(武汉)科技有限公司由中法科学家于2011年联合成立于武汉，作为ProteoGenix在中国的研发生产基地，总面积4700平方米，其中GMP级别细胞房800平方米，配置一个100平方米的无菌、无内毒素纯化实验室;仪器设备投入逾2000万。作为武汉国家生物产业基地指定的光谷抗体发现与筛选公共服务平台，普健生物具备领先的技术实力和国际化发展的战略格局，专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。公司立足于生命科学领域，自主建立生命科学研究平台、诊断原料开发平台、抗体药物研发平台，三大完善的技术服务平台：生命科学平台：拥有五大成熟高效的蛋白表达系统(哺乳动物细胞、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母、昆虫细胞)，可提供蛋白表达、分子构建-蛋白表达纯化-结构解析、抗体重组表达、鼠/兔单克隆抗体制备以及相关检测服务；诊断原料开发平台：拥有开放式全自动化学发光平台，可缩短研发周期、降低开发成本与技术风险，为广大客户提供各种诊断核心原料开发；抗体药物发现平台以single B细胞抗体发现技术，杂交瘤筛选与噬菌体展示技术为主，目前已完成构建并对外提供抗体筛选技术服务的文库有：新冠特异性抗体噬菌体文库、羊驼天然纳米抗体噬菌体文库、兔源天然抗体噬菌体文库、小鼠天然抗体噬菌体文库、另外可为客户提供鼠/兔/鸡/猪/猫/狗等物种免疫噬菌体抗体文库构建及筛选服务。
自营
ProteoGenix
抗体/试剂/技术服务
已认证品牌介绍
ProteoGenix成立于2003年，致力于开发诊断试剂和生物治疗药物，以靶向其创始人发现的关键蛋白质。ProteoGenix的管理团队迅速认识到高质量抗体和蛋白质对于生物制药产品开发的重要性，并认识到它们在进入临床应用中的巨大潜力。ProteoGenix开发的生物分子的独特特性，使其能够成功克服进入临床应用过程中的诸多挑战。凭借在治疗性抗体和定制试剂方面的深厚经验，ProteoGenix迅速在生命科学领域建立了声誉。作为主要的合同研究组织(CRO)和生物制药领域的可信赖合作伙伴，ProteoGenix在显著提升生物分子进入IND申请的成功率方面取得了卓越成就。作为服务集成商，ProteoGenix全程引导客户从早期发现到临床应用。ProteoGenix的核心目标是从一开始就洞察生物分子的未来需求，并据此制定科学的开发策略。ProteoGenix提供广泛的创新解决方案和技术，依托超过15年的行业经验和稳固的国际地位，ProteoGenix在以下六大服务领域提供独特且定制化的服务：l 抗体工程(人源化、双特异性抗体、ADC、亲和力成熟、分子优化)生物工艺开发(无知识产权限制的稳定细胞系开发、发酵及生物反应器生产优化)单克隆和多克隆抗体开发(杂交瘤法和噬菌体展示)重组蛋白和抗体生产(大肠杆菌、枯草杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞)基因合成肽合成ProteoGenix的研发实验室始终以创新为导向，通过不断优化技术流程，例如XtenCHOTM，一种瞬时表达细胞系，其生产效率超过了业界标杆ExpiCHO。此外，ProteoGenix还拥有一个包含超过20万种产品的广泛产品目录。产品涵盖抗体、蛋白质、ELISA试剂盒、细胞分离介质、核酸纯化试剂盒等，满足生命科学领域多样化的需求。
推荐产品
技术资料/正文
免疫沉淀原理及操作方法
1077 人阅读发布时间：2021-08-13 09:59
免疫沉淀原理：
免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）是一种纯化蛋白质的方法。将目的蛋白的抗体与样品提取液孵育，使抗体和蛋白质在溶液中结合。然后用protein A/G 耦合的琼脂糖凝胶，从样品中将抗体/抗原复合物提取出来。这种物理方法可将所需蛋白质从样品中分离。然后样品可以通过SDS-PAGE 进行分离并做 Western blot 分析。
免疫沉淀流程：
IP实验步骤：
1. 收获细胞，加入适量细胞IP裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上或者4℃裂解30 min， 12 000g离心30 min后取上清；
2. 取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液将1 μg 相应的抗体和10~50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃孵育过夜；
3. 免疫沉淀反应后，在4°C 以3 000 g 速度离心5 min，将protein A/G-beads离心至管底；将上清小心吸去，protein A/G-beads用1 ml 裂解缓冲液洗3~4次；最后加入15 μl 的2×SDS 加样缓冲液，沸水煮10分钟；
4. SDS-PAGE，Western blotting或进行质谱分析。
免疫沉淀实验成功关键点：
免疫沉淀实验的操作步骤比较多，同时由于在非变性条件下进行实验，所以要得到一个完美的实验结果，不仅需要高质量的抗体，同时对免疫沉淀体系也需要有严格的控制指标。免疫沉淀实验主要从蛋白样品处理，抗体-agarose beads孵育，抗体-agarose beads复合物洗涤和鉴定几个关键步骤控制操作。
免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）是一种纯化蛋白质的方法。将目的蛋白的抗体与样品提取液孵育，使抗体和蛋白质在溶液中结合。然后用protein A/G 耦合的琼脂糖凝胶，从样品中将抗体/抗原复合物提取出来。这种物理方法可将所需蛋白质从样品中分离。然后样品可以通过SDS-PAGE 进行分离并做 Western blot 分析。
免疫沉淀流程：
IP实验步骤：
1. 收获细胞，加入适量细胞IP裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上或者4℃裂解30 min， 12 000g离心30 min后取上清；
2. 取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液将1 μg 相应的抗体和10~50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃孵育过夜；
3. 免疫沉淀反应后，在4°C 以3 000 g 速度离心5 min，将protein A/G-beads离心至管底；将上清小心吸去，protein A/G-beads用1 ml 裂解缓冲液洗3~4次；最后加入15 μl 的2×SDS 加样缓冲液，沸水煮10分钟；
4. SDS-PAGE，Western blotting或进行质谱分析。
免疫沉淀实验成功关键点：
免疫沉淀实验的操作步骤比较多，同时由于在非变性条件下进行实验，所以要得到一个完美的实验结果，不仅需要高质量的抗体，同时对免疫沉淀体系也需要有严格的控制指标。免疫沉淀实验主要从蛋白样品处理，抗体-agarose beads孵育，抗体-agarose beads复合物洗涤和鉴定几个关键步骤控制操作。