感受态细胞制备方法
3751 人阅读发布时间:2021-08-13 09:31
一、什么是感受态细胞?
理化方法诱导细胞,使其处于容易吸收外源DNA的生理状态,这种细胞即为感受态细胞。
二、感受态细胞可以用来做什么?
可将构建好的载体转化到感受态细胞中进行表达,检验重组载体是否成功及进行后续的实验(如蛋白质的表达与纯化)等工作。
三、常用的感受态细胞制备方法
目前常用的感受态细胞制备方法有RbCl (KCl)法、CaCl2法、电击感受态法等。其中,RbCl (KCl)法制备的感受态细胞转化效率较高,但制备较复杂,不适合实验室用;CaCl2法简便易行,且转化效率完全可以满足一般实验要求,使用广泛;电击感受态法制备的感受态细胞转化效率高,操作简单,需要电击仪进行后续的转化工作。因此实验室感受态制备常用的两种方法就是CaCl2法和电击法。实验室常用的有大肠杆菌、毕赤酵母、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌感受态细胞,具体制备方法如下所示: