免疫沉淀常见问题及解决方案
285 人阅读发布时间:2021-08-13 09:27
免疫沉淀技术可以与基因组技术、放射同位素技术、聚合酶链式反应、免疫印迹等实验方法相结合,对较复杂的蛋白质与DNA/RNA的关系和定位提供非常好的解决方法。
这几种方法的区别:
免疫沉淀技术,再结合其他技术还可以衍生出更多的技术,先来看一下染色质免疫沉淀(CHIP)。
一、染色质免疫沉淀(CHIP):
染色质免疫沉淀 (ChIP) 是研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。原理:在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段。后期通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
应用:ChIP可以用来检测体内反式作用因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。而且,ChIP与其他方法的结合扩大了其应用范围:ChIP与基因芯片相结合建立的ChIP-on-chip方法已广泛用于特定反式因子靶基因的高通量筛选;ChIP与体内足迹法相结合,用于寻找反式因子的体内结合位点;RNA-ChIP用于研究RNA在基因表达调控中的作用。