让巨噬细胞"吃"成胖子——RAW264.7泡沫细胞模型是怎么玩的| 富衡生物

血管里的"脂肪泡泡"是怎么来的？

动脉粥样硬化本质是血管壁堆积胆固醇。关键"搬运工"是巨噬细胞——它们表面的清道夫受体（CD36、SR-A）会无负反馈地大量吞食氧化修饰后的ox-LDL，胞内堆满胆固醇酯脂滴，显微镜下呈透明泡泡状，故称泡沫细胞。泡沫细胞是动脉粥样硬化早期脂质条纹的核心成分——没有它，就没有AS。

为什么是RAW264.7？

目前最常用的两种细胞系对比：

RAW264.7优势：①省步骤，无需诱导分化；②性状稳定，CD36/SR-A表达稳定；③文献支撑强，方法成熟可重复；④成本低，DMEM+10%FBS即可。除非需要严格人源系统，RAW264.7性价比碾压。

泡沫细胞怎么"造"？

核心就一步：给巨噬细胞喂ox-LDL。

Day 1 铺板：RAW264.7接种至培养板（1-5×10⁵ cells/mL），贴壁过夜。

Day 2 诱导：换含ox-LDL新鲜培养基，两种常用条件：

• 50 μg/mL ox-LDL，处理48h（温和路线）

• 80-100 μg/mL ox-LDL，处理24h（快速路线） 对照组加等量PBS。

Day 3-4 验证：

• 油红O染色（金标准）：胞内红色脂滴 = 泡沫化成功

• CCK-8测活力：排除ox-LDL细胞毒性干扰

核心试剂就一个——人源ox-LDL。

这个模型能干什么？

1. 药物筛选（最常用）

加测试药物后检测：抑制泡沫化、促胆固醇外排、调控相关通路（PPARγ/LXRα/ABCA1/G1等）。

已筛选的代表性药物：

2. 机制研究

可研究：脂质摄取调控（CD36/SR-A/LOX-1）、胆固醇逆向转运（ABCA1/ABCG1/SR-BI）、脂噬、铁死亡、circRNA/miRNA调控网络。

3. 联合模型

ox-LDL可同时构建：HUVECs内皮损伤模型、HA-SMCs钙化模型。三模型组合即完整AS体外研究系统。

研究热点速递

铁死亡：2025年Front Pharmacol报道，ox-LDL诱导泡沫化同时触发铁死亡，阿魏酸通过HIF-1通路双抑制铁死亡和凋亡，提示抗AS需关注细胞死亡方式。

circRNA调控：虾青素通过circTPP2/miR-3073b-5p/ABCA1轴促胆固醇外排（Molecules 2023）。

纳米靶向：J Nanobiotechnology 2025报道，重组HDL靶向递送雷公藤红素促脂噬，实现泡沫细胞"精准打击"。

选择性清除：Cyclarity Therapeutics的UDP-003（2025）可选择性清除7-酮胆固醇，逆转泡沫细胞表型，已获NIH资助进入临床前开发。

写在最后

RAW264.7泡沫细胞模型构建简单、验证明确、应用广泛，是脂质代谢机制研究和药物筛选都值得掌握的模型系统。模型的每个环节——细胞状态、ox-LDL质量、染色检测——都需严格把控。这也是我们一直在做的事。

参考文献

[1] IJMS 2019 — 槲皮素通过自噬抑制泡沫细胞形成 [2] Molecules 2023 — 虾青素通过circRNA促胆固醇外排 [3] Front Pharmacol 2023 — 二萜类化合物通过PPARγ-LXRα-ABCA1通路 [4] Front Pharmacol 2025 — 阿魏酸抗铁死亡 [5] Atherosclerosis 2025 — UDP-003选择性清除7-酮胆固醇 [6] J Nanobiotechnology 2025 — 重组HDL靶向递送

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