上海富衡| 小鼠肺泡上皮细胞及MLE-12细胞系科研解析

一、小鼠肺泡上皮细胞：肺功能的核心执行者

肺泡上皮细胞是肺部气体交换的关键功能单元，分为I型（ATⅠ）和II型（ATⅡ）两类。其中，II型肺泡上皮细胞（ATⅡ）作为肺部的“再生引擎”，承担以下核心功：

1. 表面活性物质分泌：合成并分泌肺表面活性蛋白（SP-B、SP-C）及脂质，降低肺泡表面张力，维持肺泡稳定性。
2. 损伤修复：作为肺泡上皮的祖细胞，ATⅡ可增殖并分化为I型细胞（ATⅠ），参与肺损伤后的再生修复。
3. 免疫调节：通过释放炎症因子（如IL-6、TGF-β1）与免疫细胞互作，调控肺部炎症反应。

   二、MLE-12细胞系：小鼠肺泡上皮研究的标准化模型

   MLE-12是由SV40大T抗原转基因小鼠肺肿瘤建立的永生化细胞系，由上海富衡生物科技有限公司提供高纯度、高活性的标准化产品，广泛应用于呼吸系统疾病研究。

   1. 细胞起源与特性

   • 建系背景：1992年由Kathryn A. Wikenheiser通过人表面活性蛋白C（SP-C）基因启动子调控的SV40大T抗原诱导构建，源自C57BL/6雌鼠肺组。
   • 标志物表达：持续分泌SP-B、SP-C，表达Na+-K+-ATP酶及钠通道，维持肺泡液体稳态。
   • 功能特征：磷脂分泌：在佛波酯和ATP刺激下分泌磷脂，但对佛斯克林无响应。
   • 致瘤性：裸鼠接种后可于6-9个月内形成肿瘤，适用于肺癌机制研究。
   • 2. 培养优化方案（富衡生物推荐）

   MLE-12为贴壁生长细胞，需严格控制培养条件以维持其功能稳定性：

   • 培养基配置：基础培养基：DMEM/F12（94%）添加剂：2%优质胎牛血清（FBS）、1% GlutaMAX-1谷氨酰胺、1% HEPES缓冲液、1% ITS（胰岛素-转铁蛋白-硒复合物）、10 nM氢化可的松及雌二醇。
   • 传代管理：细胞密度达80%-90%时，使用0.25%胰酶-EDTA消化1-3分钟，按1:2至1:3比例传代，每周2-3次。
   • 首次传代建议保留原代培养基以稳定细胞状态，避免因环境突变导致功能异常。
   • 3. 科研应用场景
   • 肺纤维化机制研究：香烟烟雾/TGF-β1模型：模拟肺泡上皮间质转分化（EMT），检测α-SMA、MMP-9等纤维化标志物的表达动态。
   • JAK2/STAT3通路调控：通过AngⅡ刺激结合AG490抑制剂，解析信号通路在EMT中的作用。
   • 药物开发与毒性评估：抗纤维化药物筛选：利用Shp2抑制剂PHPS1或CRISPR-Cas9基因编辑技术，评估药物对胶原沉积及炎症因子的调控效果。
   • 顺铂毒性测试：通过MTT法及Western blot检测细胞活性与凋亡相关蛋白表达。
   • 基因功能研究：腺病毒载体转染：介导γ干扰素等基因表达，研究其对EMT或炎症反应的调控机制。

   三、MLE-12的差异化优势

   相较于原代ATⅡ细胞，MLE-12具备以下实验优势：

   1. 永生化特性：SV40大T抗原介导的永生化确保细胞无限增殖，避免原代细胞培养周期短、批次差异大的问题。
   2. 功能稳定性：持续表达SP-B/SP-C，保留肺泡上皮的典型功能特征，适用于长期动态实验。
   3. 标准化模型：ATCC认证（CRL-2110），提供严格的支原体检测及STR鉴定报告，确保数据可重复性。

   四、富衡生物技术支持与服务体系

   上海富衡生物科技有限公司为科研用户提供MLE-12细胞全流程解决方案：

   • 细胞资源：提供ATCC来源的冻存细胞株（含复苏指南）及专用培养基（IM-M015-1），减少批次间差异。
   • 实验辅助：基因编辑服务：CRISPR-Cas9靶向敲除/过表达（如TGF-β1、STAT3等基因）。模型构建：定制化肺纤维化、药物毒性测试模型，配套检测试剂盒（如α-SMA抗体、胶原定量试剂）。
   • 售后保障：提供72小时细胞状态确认服务，若发现污染或活性异常，可申请免费重发