腺病毒载体综述
遗传疾病的基因治疗
囊性纤维化是一种相对普通的隐性遗传疾病，由CFTR 基因突变造成，导致氯离子传导性降低，钠离子吸收率升高。由于这种缺陷在肺里表现得很明显，因此对肺有亲嗜性的腺病毒成为可选择的递送该疾病治疗基因的载 体之一。然而，多种研究显示要成功地实现转基因表达还有很多障碍，其中之一是标准的Ad2/5 载体不能感染高度分化的导气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞，这主要是由于CARs 的缺乏（Kaner et al.1999； Pickles et al. 1998； Walters et al.1999）。已尝试过用阳离脂质体和磷酸钙共沉淀的方法来提高病毒的感染率（Alton et al. 1999； Fasbender et al.1997. 1998； Lee et al.1999 a）。一个更有希望的途径是构建带有Ad17（血清型）纤突的腺病毒嵌合体，这种方法提高了腺病毒与导气管上皮细胞的结合力（Zabner et al.1999）。阻碍转基因成功表达的另一个障碍是特异的肺相关T 辅助细胞效应（van Ginkel et al. 1997），新近的研究则显示了载体中E4 基因的保留对于抵消这种袭击效应的重要性（Armentano et al. 1997； Chirmule et al.1998；Lusky et al.1999； Yew et al.1999）。更深一层的、天然的障碍是导气管上皮细胞可释放出具有抗腺病毒特性的抗菌多肽（Gropp et al.1999），而且，对支气管肺泡灌注液的研究显示除了中和性抗体外，还存在着腺病毒抑制因子（Bastian & Bewig.1999）。许多的这些因子可能可以解释早期腺病毒载体用于临床试验的结果，即，虽然转导效率得到证实，但整体的效率还是很低，转基因的表达 时间相当短（Zuckerman et al.1999）。今后的载体能否提高转基因的表达效率和持续时间还有待于观察。
为了修复导致肌肉萎缩症的基因缺陷，大量地尝试了腺病毒载体的使用。在一个小鼠模型系统中，编码营养障碍基因（dystrophin）的载体可以递送到肌 肉纤维中，使肌肉功能出现了一定程度的改善，但这只是暂时的，因为出现了抗载体和转基因的严重免疫反应（Yang et al.1998； Yuasa et al.1998）。为了克服这一点而采取的措施包括使用改良的载体（Kumar-Singh & Chamberlain. 1996）和使用utrophin（dystrophin 的同系物）（Gilbert et al.1999），这些尝试显示出了较好的转基因持久性。阻碍基因有效转导的障碍之一与细胞上缺乏所使用载体的受体相关，而带有多聚赖氨酸修饰的纤突的载体显著 地促进了肌肉细胞对病毒载体的摄取（Bouri et al.1999）。已知肌肉纤维细胞中的免疫反应是由树突状细胞介导的，同时暗示AAV 载体可能是递送转基因的更好的载体（Jooss et al.1998 c）。一个犬模型系统也显示出免疫反应的重要影响，因为用腺病毒递送了dystrophin 基因后再用环孢菌素治疗得到了更为持久的肌肉功能的改善（Howell et al.1998）。
已经构建了许多载体以减轻其他组织中的基因缺陷，在基因递送方面也遇到了类似的问题。