雌三醇(E3)酶联免疫试剂盒说明书
2023-04-25 14:48点击次数:303
关键词:雌三醇(E3)检测试剂盒免疫试剂盒
货号:FY-EU6344 规格:96T
使用目的
该试剂盒用于定量检测血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物体液中的E3浓度。
特异性
- 灵敏度:0.6ng/mL.
- 检测范围:1.23-100ng/mL.
- 在E3和类似物之间没有检测到显著的交叉反应或干扰。
- 重复性:变异系数<11%。
该试剂盒采用竞争抑制酶联免疫吸附法原理。酶标板预包被亲和纯化的抗E3的抗体。将待测抗原(标准品或样本)和生物素标记的抗原加入到酶标板中,它们对固相抗体进行竞争结合。接着洗涤去除未结合的物质,加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶(SA-HRP)以形成固相抗体-生物素标记抗原-SA-HRP的复合物。然后,将TMB溶液加入孔中并进行孵育,酶促反应产生蓝色物质,加入终止液后,变成黄色。颜色深浅与样本中待测抗原的含量呈现负相关。在 450 nm 波长下测定吸光值。最后通过建立标准曲线,根据OD值来计算样品中E3的浓度。
限制性
- 本试剂盒仅用于实验室科学研究,如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途,我们将不对任何后果负责。
- 由于其有效性的不确定性,该试剂盒可能不适合检测某些特殊的实验样品,例如基因敲除实验样品。
- 本试剂盒应在有效期内使用,并请严格按照说明书进行存储。
- 不同厂家的试剂盒或通过其他方法检测相同的指标可能会产生不一致的结果
- 由于试剂盒中使用的抗体通常是由重组蛋白作为免疫原制备而成,而重组蛋白可能会受限于不同的片段、表达和纯化体系,因此不建议使用此试剂盒来检测重组蛋白。
- 为了获得最佳实验结果,请仅使用我们提供的试剂,并且不要混用不同批次的试剂。
- 由于现有条件和科学技术的局限性,我们无法全面识别和分析供应商提供的原材料。因此,该试剂盒可能存在一定的质量和技术风险。
- 在ELISA实验测试所有影响因素之前,不能排除干扰的可能性。
- 为了获得可重复的结果,应严格控制实验中的每个步骤,样品收集、处理和存储的变化也可能导致样品测量的差异。
试剂盒组份
| 组份 | 描述 | 存储条件 |
| 预包被微孔板 | 8孔× 12条 | -20℃ |
| 标准品 | 冻干粉, 2支 | -20℃ |
| 检测试剂 A(100×) | 生物素结合物, 1× 120μL | -20℃ |
| 检测试剂 B(100×) | SA-HRP 酶结合物, 1× 120μL | -20℃ |
| 标准品稀释液 | 标准品的稀释, 1× 20mL | 2-8℃ |
| 检测试剂A稀释液 | 稀释检测试剂A, 1× 12mL | 2-8℃ |
| 检测试剂B稀释液 | 稀释检测试剂B, 1× 12mL | 2-8℃ |
| 洗涤液 (30×) | 洗去未结合的物质, 1× 20mL | 2-8℃ |
| TMB 试剂 | 四甲基溶液, 1× 9mL | 2-8℃ |
| 终止液 | 1N 硫酸, 1× 6mL | 2-8℃ |
| 封板膜 | 微孔板封膜, 4张 | |
| 使用说明 | ELISA 试剂盒操作说明, 1份 |
存储
- 收到试剂盒后,未开封的试剂盒可在4℃下保存1个月。如果试剂盒在1个月内未使用,请在收到试剂盒后,将每个组件分别存放在上表中指示的温度下。
- 使用试剂盒时,剩余试剂应按上表存储条件贮存。
- 未使用的板条应立即放回装有干燥剂的铝箔袋中,重新密封并在-20℃下存储。
- 所有试剂瓶盖必须拧紧,以防止蒸发或微生物污染,使用测量仪器量取体积,不能直接将试剂瓶内试剂全部倒出。
- 包装盒上的标有产品的有效期,所有组份在保质期内保证稳定。
带450nm波长滤光片的酶标仪
37℃恒温箱
高精度单道或多道移液器
一次性移液器吸头
EP管
加样槽
洗板机
去离子水或蒸馏水
用于微孔板的吸水纸
注意事项
- 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验,尤其是在检测血样或其他体液时。
- 新打开的ELISA酶标板可能含有水雾样物质,此为正常现象,不会对实验结果产生任何影响。
- 不得重复使用标准品工作液、检测试剂A工作液、检测试剂B工作液。
- 酶标仪需要安装450 ±10nm波长的滤光片和能检测450 ±10nm波长的检测器,且光密度值在0-3.5之间。
- 本说明书也适用于48T试剂盒,但48T试剂盒的所有试剂均减半。
- 溶解含有蛋白质溶液时,应始终避免起泡。
- 为避免交叉污染,在每个标准品浓度加样之间、样品加样之间以及试剂加样之间更换移液器枪头。此外,应为每种试剂使用单独的储液瓶。
- 为了得到准确的实验结果,在孵育过程中,必须确保封板膜将酶标板密封。
- 在使用自动洗板机时,添加清洗缓冲液后,在清洗步骤之间添加30秒的浸泡时间可提高分析精度。
11.终止液应按照与加底物溶液相同的顺序添加到酶标板中。添加终止液后,孔中溶液的颜色将从蓝色变为黄色。绿色的孔表明终止液未与底物溶液充分混合。
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