古朵技术带您了解电镜固定液选择及配制

　　电镜固定液选择及配制了解一下
 

　　目前电镜被广泛运用于各器官系统疾病的病理诊断中，除了运用在肿瘤的诊断与鉴别诊断中，用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断，其中透射电子显微镜是最早，最guang泛应用于医学领域的一种电镜。随着电镜在医学上的应用，人类通过观察细胞膜和细胞浆内的各种细胞器和细胞核的细微结构及其病理变化，由此产生了亚细胞结构病理学(substructural pathology)，又称超微结构病理学(ultrastructural pathology)。

　　古朵生物技术小编介绍电镜生物样品固定液的选择及其配方：

　　1、缓冲液的配制

　　在配制固定液之前，应先配制缓冲液。

　　0.2M磷酸缓冲液的配制：

　　磷酸2氢钠(NaH2PO4.H2O) 2.6g

　　磷酸氢2钠(Na2HPO4.12H2O) 29g

　　重蒸馏水加至500ml

　　调pH至7.4

　　2、(灌注)固定液的配制

　　4%多聚甲醛：用0.2M磷酸缓冲液配制，重蒸馏水补足容积。

　　4%多聚甲醛+(0.5-2%)w二醛，以4%多聚甲醛+1%w二醛为例，配方如下：

　　0.2M磷酸缓冲液的配制 100ml

　　25%w二醛(电镜专用) 4ml

　　重蒸馏水加到200ml

　　多聚甲醛和w二醛混合固定液配制方法：

　　(1)4%多聚甲醛+5%w二醛：溶解2g多聚甲醛于25ml双蒸水中，80℃水浴，摇动使之溶化后加1-3滴1M NaOH，使溶液澄清。冷却后加10ml 25%w二醛，再加15ml 0.2PB，调pH备用。此固定液中含多聚甲醛4%，w二醛5%，属高渗液，但固定效果不错，尤其对细胞内的微管保存较好。

　　(2)2%多聚甲醛+2%w二醛：溶解1g多聚甲醛于25ml双蒸水中，80℃水浴，摇动使之溶化后加1-3滴1M NaOH，使溶液澄清。冷却后加4ml 25%w二醛，再加21ml 0.2PB，调pH备用。常规固定选用这种配方。

　　(3)4%多聚甲醛+0.5%w二醛：溶解2g多聚甲醛于25ml双蒸水中，80℃水浴，摇动使之溶化后加1-3滴1M NaOH，使溶液澄清。冷却后加1ml 25%w二醛，再加24ml 0.2PB，调pH备用。推荐用作免疫电镜标本固定剂，对于抗原较强的标本，可将浓度降低到2%多聚甲醛+0.25%w二醛。

　　多聚甲醛和w二醛混合固定液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。