SIRC兔角膜上皮细胞--智立中特生物 现货

　一、细胞简介：

　　细胞名称：SIRC兔角膜上皮细胞

　　平台编号:zl-057189

　　组织来源：兔角膜

　　细胞种属：其他源

　　生长特性：贴壁

　　培养基：EMEM

　　形态特征：成纤维细胞

　　传代方法：1：4至1：8

　　细胞描述：该细胞系适用于风疹病毒的初步分离。不同细胞病变的早期出现使得该细胞系非常适合风疹病毒的繁殖和定量。

　　细胞冻存：液氮冻存（冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO）

　　细胞运输：干冰运输（2ml冻存管）或活细胞运输（T25瓶）

　　二、注意事项

　　冻存细胞接收后的处理：

　　1.干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏；

　　2.收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

　　复苏细胞接收后的处理：

　　1.收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

　　2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

　　3.建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

　　三、细胞培养方法：

　　1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

　　①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

　　②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

　　③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

　　④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

　　⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

　　⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

　　2、细胞复苏：

　　①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

　　②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

　　3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

　　①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

　　②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

　　③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

　　④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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