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聊聊你可能想要了解的 ELISPOT(酶联免疫斑点斑点法)实验 细胞因子常用的检测手段有很多,ELISA, 流式等等,今天就来讲讲不少同学还不是很熟悉的ELISPOT。 什么是 ELISpot? -- Enzyme-linked immunoSpot assay,是用于在单细胞水平检测细胞因子(CK)分泌细胞和抗体分泌细胞(ASC)的一项细胞免疫学检测技术。ELISpot 原理类似于双抗夹心 ELISA,只是将 ELISA 实验中的上清换成细胞悬液+刺激物,在 ELISpot 板中培养细胞,最终每个会分泌细胞因子或抗体的细胞的位置,就会显色留下斑点印迹,通过专业的斑点成像仪器(如AID ELISPOT Reader)就可以进行计数和分析。 ELISpot 与 ELISA 有什么不同?
ELISpot 实验原理介绍: 实验需要准备: 96 孔覆 PVDF 膜的 ELISPOT 专用板(空白板子可以购自 Millipore),待测细胞因子的抗体对(如 IFN-r 纯化单抗,用于包被;ALP 标记的 IFN-r 单孔,用于检测;底物显色液。(试剂可以购自Mabtech,BD,RD等)。自动化的读板仪器,如 AID ELISPOT Reader。 当然,不差钱的实验室可以直接买预包被的 ELISpot 试剂盒,省去包被的时间,减少影响实验结果的又一可变因素,一般来说预包被试剂盒最终拿到的板子背景会更干净,斑点也会显色的更加清晰致密。 实验原理: ELISpot 技术优势: 高灵敏度 单细胞水平 活细胞功能检测 细胞可回收利用 ELISpot 实验适用于检测比率较低的抗原特异性的T细胞免疫反应和B细胞免疫反应。 具体应用领域:T, B 细胞功能研究/感染性疾病研究、抗原决定簇图谱分析、化合物和药物免疫学反应的筛选、肿瘤研究、疫苗研发、自身免疫病研究、移植中排斥反应的预测、过敏性疾病研究等等。 ----------------------------------------------------------------------------------------------------
若您 ELISPOT 实验中有任何问题,或者索要详细的 ELISPOT protocol,欢迎联系德国艾迪(AID)公司 技术支持:010-59792032,info@aid-china.com.
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