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Cignal Lenti Reporter Assay
在任一种哺乳动物细胞中进行信号通路活性的测定
Cignal Lenti Reporter Assay 是立即可转导的慢病毒颗粒,可实现在任一种哺乳动物细胞中进行信号通路的测定。通路特异的报告基因利用经过实验验证的转录因子反应元件,这些元件位于生物发光或荧光报告基因的上游。
适用于多种应用的报告基因
Cignal Lenti Reporter 系统独一无二地将转录因子报告基因技术和慢病毒导入力量结合起来。这些报告基因是功能基因组学和药物开发中评估通路活性的强有力工具。当一个候选药物、基因knockdown(利用siRNA)、过表达事件(表达载体)或肽段激活了或抑制一个信号通路时,萤光素酶或GFP 报告基因的活性同时受到调控,并可被快速、定量地测定。Cignal Lenti Reporter 经过特别设计,可在您的实验室中安全使用。
Cignal Lenti Reporter Assay可提供:
■ 立即可用的、已滴定效价的慢病毒颗粒 ■ 任意细胞类型中信号通路的测定 ■ 稳定细胞系的产生
图1. NFAT Cignal Lenti Reporter Assay 测定了人原代细胞[ 正常人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)] 中PKA/Ca++ 通路的活性。NFAT Cignal Lenti Reporter Assay (4×105 TU) 和Cignal Lenti Renilla Control (1×105 TU) 共转导入10,000 个PASMC 细胞。Renilla luciferase control 被用于做校正的内参。转导48 小时后,更换培养基。转导54 小时后,使用10 ng/ml的 PMA 和 0.5 μM 的ionomycin 处理细胞18 个小时。裂解细胞,测定荧光素酶的活性。
图3. 利用Cignal Lenti Reporter Assay 产生一种稳定
的NFκB 通路敏感细胞系。通过使用NFκB Cignal Lenti
Reporter Assay 转导HEK-293 细胞和稳定筛选建立NFκB 通路敏感细胞系。通过使用10 ng/ml of TNFa 处理第1 代,第5 代,第10 代,第15 代细胞来检测是否生成了稳定的细胞系。
Cignal Lenti Reporter Assay:
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