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        人脐静脉内皮细胞(HEUVC)消化重悬后自动聚团,怎么解决?

        user-title

        dxy_wmbygf19

        有没有同学在养HUEVC呀!救命

        我用multicell 90%DMEM+10%FBS培养,融合度达90%后,用0.25%胰蛋白酶室温消化5分钟,离心1000rpm5分钟,去掉上清,加入新培养基将细胞吹打成单细胞后(肉眼未见细胞团),转移至培养瓶,但是很快细胞就自动聚团了(半分钟之内发生,肉眼可见的细胞团块,斑片状)。

        以下是悬浮状态下的镜下观,很多细胞团。

        图片描述

        贴壁之后细胞也是一团一团的生长。

        图片描述

        后面认为是消化强度不够又用0.25%胰酶+0.53mMETDA消化3分钟,依旧聚团。各位大佬都是怎么消化的呢?或者是我的培养体系不合适吗?

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        2 个回答

        user-title

        溺水行粥

        有帮助

        消化1分左右,变圆,就终止,可以试试

        user-title

        dxy_wmbygf19user-title

        谢谢,已经解决了,买新细胞了😂

        user-title

        dxy_8reajdze

        有帮助

        我也养这个,也是很容易聚团,后来师姐说可以涡旋,我后面就重悬后涡旋3到5秒钟,就分散得很好了

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