细胞状态老是不好，求助

在细胞融合度达到70—80%时传代，不要过满，及时换培养基

自己提原代细胞传代细胞传不了几代，就是得经常提。

有几种可能，离心重悬以后接种到新皿里的细胞悬液没有晃匀,导致细胞密度不均,低密度的地方细胞长不起来?六个皿叠起来放在培养箱里导致氧气进不进去皿里,细胞缺氧?喷了太多酒精流进了皿里导致细胞死亡?细胞飘的多的时候没有及时换液?

这个一般跟培养条件、血清和消化时间等多种因素有关。如果培养条件和血清等都跟消化前的一致的话，需要考虑下消化时间是不是过久了，可以适度缩短消化时间，只要细胞变圆、轻拍脱落后便即刻终止消化，减轻消化对细胞的损伤

细胞密度太大了，降低细胞密度试一试

有可能是细胞消化过度了，原代细胞本身传代能力是有限的，有些甚至不能传代

原代内皮细胞本身也就只能传个3-5代的样子，再者内皮细胞的培养过程中需要加些生长因子，DMEM的营养显然是不够的，最好用内皮细胞专用培养基

我觉得状态还是可以的，刚传代，细胞数不可能跟传代之前一样的